产品名称:Hyaluronate-PEG-SH,HA-PEG-Thiol的制备过程
一、透明质酸(HA)活化
透明质酸末端的羧基需通过化学偶联剂活化,以增强其反应活性。常用方法为碳二亚胺法:
溶解HA:将透明质酸溶解于磷酸盐缓冲液(PBS)中,形成均匀溶液。
加入偶联剂:依次加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)。EDC作为缩合剂,先与HA羧基反应生成活性中间体O-酰基异脲;随后NHS与该中间体反应,形成稳定的NHS酯,使HA羧基被活化。
二、聚乙二醇(PEG)偶联
活化后的HA与一端修饰有氨基的PEG(PEG-NH₂)通过亲核取代反应连接:
反应条件:在弱碱性环境(pH 7-8)下,PEG-NH₂的氨基作为亲核试剂,进攻HA-NHS酯的羰基碳,形成稳定的酰胺键。
产物分离:通过透析或凝胶过滤纯化反应液,去除未反应的PEG和副产物,得到HA-PEG中间体。
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三、巯基(-SH)引入
在HA-PEG的PEG末端引入巯基,增强材料反应活性:
化学修饰法:
试剂选择:使用含巯基的试剂(如巯基丙酸)和缩合剂(如EDC/NHS)。
反应过程:巯基丙酸在EDC/NHS作用下,通过酯化或酰胺化反应连接到HA-PEG末端,形成HA-PEG-SH。
点击化学法:
试剂选择:若PEG末端修饰有烯基,可采用巯基-烯点击化学。
反应过程:巯基与烯基在催化剂作用下发生加成反应,高效引入巯基。
纯化与储存:
纯化:通过透析、凝胶过滤或沉淀法去除未反应原料和副产物。
储存条件:产物需在-20℃以下冰冻、干燥保存,避免巯基氧化。
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安齐岳生物科技有限公司
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