如何进行生物制品的无菌检查？——药典方法

药典对于生物制品的无菌检查有明确严格的要求。 药典要求无菌的药品包括各类注射用制剂、眼科用制剂以及用于手术、严重烧伤、严重创伤产品等凡直接进入人体血液循环系统、植入或埋入肌肉、皮下组织、与创伤部位接触的产品或材料或器械以及医学使用上要求无菌的品种都需要按照药典的规定进行无菌检查。

一、药典规定方法

药典上无菌检测的方法分为薄膜过滤法和直接接种法。

1、薄膜过滤法原理

将规定量的供试品或供试液通过薄膜过滤处理，使产品中可能存在的微生物过滤时被阻留、富集在微孔滤膜上，然后接种适宜的培养基，使滤膜上阻留的微生物得以生长繁殖到肉眼能观察到的状态而被检出，有抑菌性的供试品通过薄膜过滤后，用适当的冲洗液冲洗滤膜、滤器充分消除残留的抑菌成分，使滤膜上阻留的微生物得以生长繁殖到肉眼能观察到的状态而被检出。

2、直接接种法原理

将规定量的供试品直接接种到适宜的培养基中培养，使供试品中可能存在的微生物得以生长繁殖到肉眼能观察到的状态而被检出。

二、试验方法

供试品无菌检查所采用的检查方法和检验条件应与方法适用性试验确定的方法相同。

1、薄膜过滤法

• 采用适宜的样品处理方式，将规定量的供试品过滤至滤膜上，如果供试品具有抑菌作用，使用冲洗液冲洗滤膜，冲洗次数、冲洗量同方法适用性试验。

• 样品冲洗后，除生物制品外，1份滤器中加入100 ml硫乙醇酸盐流体培养基，1份滤器中加入100 ml胰酪大豆胨液体培养基。生物制品样品冲洗后，2份滤器中加入100 ml硫乙醇酸盐流体培养基，1份滤器中加入100 ml胰酪大豆胨液体培养基。在各培养基规定的温度下培养不少于14天。

2、直接接种法

• 采用适宜的样品处理方式，取规定量供试品分别等量接种至硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基中。

• 除生物制品外，一般样品无菌检查时两种培养基接种的瓶或支数相等；生物制品无菌检查时硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基接种的瓶或支数为2:1。

• 供试品检查时，培养基的用量和高度同方法适用性试验。在各培养基规定的温度下培养不少于14天。

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三、结果判定

若供试品管均澄清，或虽显浑浊但经确证无菌生长，判供试品符合规定；若供试品管中任何一管显浑浊并确证有菌生长，判供试品不符合规定，除非能充分证明试验结果无效，即生长的微生物非供试品所含。