【试剂描述】
小麦胚芽凝集素(Wheat Germ Agglutinin, WGA)是一种从小麦胚芽中分离的凝集素,能够特异性识别N-乙酰葡糖胺和唾液酸等糖结构。通过荧光染料标记,如AF700,WGA的特异性结合能力可与荧光检测技术结合,从而扩展其在可视化研究中的应用。本文将对AF700标记的WGA进行系统介绍,涵盖其基本特性、制备方法、应用领域及使用注意事项。
【试剂名称】
英文名称:AF700 WGA,Alexa Fluor700 WGA,AF700 Wheat Germ Agglutinin,Alexa Fluor700 Wheat Germ Agglutinin
中文名称:小麦胚芽凝集素-Alexa Fluor700,AF700标记WGA,AF700标记的小麦胚芽凝集素,红色荧光探针AF700标记的小麦胚芽凝集素
【AF700荧光染料的技术参数】
AF700是一种远红色荧光染料,激发波长约700 nm,发射波长约720 nm。其荧光光谱位于远红色区域,可减少生物样本中自发荧光的干扰,提升信噪比。AF700具有较高的摩尔消光系数和适中的荧光量子产率,光稳定性较好,适用于长时间成像实验。此外,该染料在水性缓冲液中溶解性良好,便于与生物分子偶联。
【试剂详情】
货号:Y-R-4136
规格:5mg,10mg,25mg
外观性状:固体
溶解性:溶于大部分有机溶液。
纯度标准:≥95%
供应商:陕西新研博美生物科技
储存条件:-20℃以下冰冻、干燥、避光。
备注事项:避免频繁解冻,现配现用,保持干燥,避光。
用途:仅供科学研究或工业应用等,非食用、非医疗用途使用
【在科研领域中的应用示例】
细胞生物学研究:用于标记细胞膜表面的糖结构,通过荧光显微镜或流式细胞术观察糖基化模式的分布与变化。
植物科学:在植物细胞分析中,WGA可结合细胞壁中的几丁质类似物,辅助研究细胞壁组成和结构。
糖生物学:作为探针,检测糖蛋白或糖脂在组织切片或溶液中的定位,有助于解析糖类在生物过程中的作用。
生物成像技术:利用AF700的远红色荧光,该标记物适用于多色成像实验,减少与其他荧光染料的信号重叠。
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【实验使用指南与注意事项】
使用AF700标记的WGA时,需遵循标准实验流程:
优化条件:建议在正式实验前进行浓度梯度测试,以确定合适的染色浓度(通常为1-10 µg/mL)。染色时间、温度和pH值应根据样本类型调整。
样本处理:该标记物可用于固定或活细胞染色,但活细胞实验需控制染色时间以避免非特异性结合。染色过程应在避光条件下进行,减少荧光淬灭。
对照设置:为验证结合特异性,建议设置阴性对照(如未标记WGA)或竞争性抑制实验(加入过量N-乙酰葡糖胺)。
成像与保存:染色后的样本建议使用抗淬灭封片剂,并立即成像。如需保存,应置于-20°C避光环境,避免反复冻融。
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(以上资料由陕西新研博美生物科技WWH编辑汇总)
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