浙中医大附属宁波市中医院团队揭示温阳消癥汤通过JAK2/STAT3信号调节巨噬细胞极化减轻肾纤维化

【写在前面】：本期推荐的是由浙江中医药大学附属宁波市中医院宁波中医药研究院、浙江中医药大学附属宁波市中医医院肾内科、上海中医药大学附属曙光医院等研究团队合作近期发表于Journal of Ethnopharmacology(IF5.4）的一篇文章，揭示温阳消癥汤通过JAK2/STAT3信号通路调节巨噬细胞极化减轻肾纤维化。

【期刊简介】

【题目及作者信息】

Wenyang Xiaozheng decoction modulates macrophage polarization via JAK2/STAT3 signaling pathway to reduce renal fibrosis

民族药理学相关性

温阳消癥汤（WYXZ）是一种基于“温阳化瘀”原理的中药方剂，临床上已证实能改善慢性肾脏病（CKD）患者的肾功能。然而，其治疗作用的确切机制仍有待阐明。

研究的目的

探讨WYXZ是否通过JAK2/STAT3信号通路调节巨噬细胞极化，从而减轻肾纤维化。

材料和方法

C57BL/6J小鼠经5/6肾切除、WYXZ（4.94或9.88 g/kg）或缬沙坦治疗8周后出现肾纤维化。检测肾功能（血肌酐/尿素氮）、组织病理学（HE/Masson染色）和巨噬细胞极化（CD86+/CD206+流式细胞术）。体外培养RAW264.7巨噬细胞，用WYXZ药物血清（2.5～7.5%）±JAK2激动剂丁酰胺或STAT3 shRNA处理后，观察炎症反应（ELISA检测IL-6/IL-10分泌）、极化状态（流式细胞术检测）和JAK2/STAT3通路活化（Western blot检测磷酸化JAK2/STAT3）。在RAW264.7/HK-2共培养物中评估纤维化标记物（α-平滑肌肌动蛋白、α-SMA/Ⅰ型胶原、Col-I）。

结果

WYXZ能显著减轻5/6肾切除小鼠的肾纤维化，改善肾功能，同时抑制M1巨噬细胞极化，增强M2极化。在体外，WYXZ含药血清可减少LPS刺激的巨噬细胞分泌炎性细胞因子并抑制JAK2/STAT3通路的激活。这些作用被JAK2兴奋和丁酰胺逆转，并通过STAT3基因敲除而消除。关键的是，在巨噬细胞-肾小管细胞共培养中，WYXZ通过抑制巨噬细胞JAK2/STAT3信号通路减少纤维化标志物的表达。

结论

WYXZ通过抑制JAK2/STAT3，重新编程巨噬细胞极化，从而减轻肾纤维化，验证其对CKD的传统用途。

图文摘要

【前言】

慢性肾脏病（CKD）是一种不可逆的进展性疾病，可导致肾功能不全和结构损害。CKD是一个重大的公共卫生问题，因为它在全球的发病率超过8亿，发病率、死亡率和相关的医疗费用都很高。肾纤维化是所有形式的进展性肾病的最终共同病理途径，其发展与小管间质区域细胞外基质（ECM）的过度积累和降解不足有关。目前有效治疗肾纤维化的方法有限，主要涉及透析和非特异性药物，这些药物不能逆转与肾纤维化相关的病理过程。

M1巨噬细胞具有表面标志物CD86的特征，能够促进一氧化氮（NO）和几种促炎介质（如白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α））的产生。随后，这会导致肾损害。相反，M2巨噬细胞通过表面标记物（如CD206）和分泌细胞因子（如IL-10和转化生长因子β（TGF-β））来识别，这些细胞因子有助于组织修复、伤口愈合、抗炎过程和免疫调节。由于巨噬细胞具有明显的异质性，靶向特异性巨噬细胞亚群可能成为CKD患者潜在的治疗策略。

温阳消癥汤（WYXZ）是在多年临床经验的基础上研制而成的中药复方。包括七种中草药（通过https://www.worldfloraonline.org)黄芪30 g，党参30 g，淫羊藿15 g，肉苁蓉15 g，桃仁 15 g。12 g、川芎15 g、莪术30 g。WYXZ中所有成分药材的剂量均严格符合《中国药典》（中国药典委员会，2020）中规定的标准，或已通过包括中国科学院院士和国家中医药大师在内的中医临床领军专家的验证。在中医理论中，WYXZ旨在补气、温阳、活血化瘀——历史上用于治疗“肾阳虚”和“血瘀”综合征的治疗原则，其临床表现与现代CKD表现相匹配，如水肿、疲劳和肾功能不全。WYXZ的现代临床应用验证了这些传统用途。我们的随机试验表明，WYXZ通过显著降低尿素氮、血肌酐和尿纤维化因子TGF-β1水平，同时增加估计肾小球滤过率（eGFR）和血清白蛋白水平，有效且安全地增强3期慢性肾脏病（CKD）患者的肾功能。（Zhou等人，2024年）。动物实验表明，WYXZ改善了5/6肾切除小鼠的肾功能和肾纤维化诱导的病理变化，抑制了TGF-β1/smad3信号通路，并下调了ECM成分如I型胶原（Col-I）、III型胶原（Col-III）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和纤维连接蛋白（FN）的表达。然而，其对巨噬细胞极化的影响尚不清楚。

本研究旨在探讨WYXZ通过调节JAK2/STAT3信号通路调节巨噬细胞极化，发挥抗炎和抗纤维化作用的潜能。

【结果部分】

1.温阳消癥汤 (WYXZ) 提取物的 HPLC 指纹图谱。

2.WYXZ可改善5/6肾切除小鼠的肾功能和肾纤维化。

3.WYXZ调节纤维化肾巨噬细胞极化并抑制JAK2/STAT3活化。

4.WYXZ对LPS刺激RAW264.7细胞巨噬细胞极化及JAK2/STAT3信号通路的影响。

5.WYXZ通过抑制JAK2活化抑制RAW264.7细胞极化和炎症因子分泌。

6.STAT3基因敲除可消除WYXZ介导的对RAW264.7细胞炎症和巨噬细胞极化的抑制作用。

7.WYXZ通过抑制巨噬细胞JAK2/STAT3信号通路抑制HK-2细胞肾纤维化标志物。

8.WYXZ通过JAK2/STAT3通路抑制巨噬细胞极化从而减轻肾脏炎症和纤维化。

【结论与讨论】

总之，本研究强调了巨噬细胞极化诱导的炎症反应在肾纤维化中的作用，并强调了JAK2/STAT3通路在这一过程中的中心作用。从治疗角度来看，这些发现表明WYXZ通过抑制JAK2/STAT3信号通路调节巨噬细胞极化，从而显著增强5/6肾切除小鼠的肾功能，最终抑制炎症反应并减轻纤维化（图8）。提示WYXZ是治疗CKD肾纤维化的有效药物。

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