在免疫沉淀(IP)实验中,设置严谨的对照是区分真实信号与实验假象、确保数据可靠性的基石。其中,IgG阴性对照扮演着至关重要的“背景清除者”角色。
什么是IgG阴性对照?
为何必须设置IgG阴性对照?
- 与固相支持物(磁珠/琼脂糖珠)的非特异性吸附
- 与抗体Fc段或框架区的非特异性结合
- 样本中某些蛋白与IgG本身的非特异性相互作用
如果在后续的WB检测中,IgG阴性对照组出现了除抗体轻重链以外的条带,则明确提示存在上述非特异性结合。此时,实验组中相同位置的条带就不能被简单认定为是目标蛋白。通过对比实验组与IgG对照组的WB结果,可以清晰地排除这些背景干扰,确认IP条带的特异性来源于目标抗体与抗原的特异性结合。
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如何正确使用IgG阴性对照?
为了帮助研究者更便捷、更规范地设置这一关键对照,亚科因生物(ABBKINE)在其通用型IP/Co-IP工具箱中,直接提供了即用型的IgG阴性对照。ABBKINE自成立以来,始终致力于通过提供高品质、标准化的研究工具来赋能科研。其产品设计充分考虑了实验的完整性与严谨性,内置的阴性对照试剂确保了研究者无需额外寻找和配制,即可轻松完成对照实验,为数据的真实性与说服力提供了有力保障。
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