Sulfo-Cy3-PSMA的操作规范

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产品名称：Sulfo-Cy3-PSMA的操作规范
一、储存条件与稳定性管理
温度控制：需-20℃以下避光、干燥保存，分装避免反复冻融。复溶后储液（建议浓度1-5mM）应立即使用，未用溶液需分装冷冻于-80℃或-20℃（≤3次冻融循环），避免室温长时间放置。
环境防护：全程避光保存，可置于氮气/氩气环境中减少氧化风险。避免与强氧化剂、还原剂（如DTT、β-巯基乙醇）、金属离子（如Fe³⁺）接触，防止荧光淬灭或化学降解。
溶剂兼容性：易溶于水、PBS（pH 7.4）或极性有机溶剂（如DMSO），配制储备液时需现配现用，避免长期储存导致沉淀或活性损失。
二、操作流程与反应条件优化
反应体系设计：
pH与缓冲液：推荐pH 7.0-9.0的弱碱性环境（如1M NaHCO₃缓冲液或HEPES缓冲液），避免酸性条件导致染料水解或PSMA配体变性。
温度与时间：室温（25℃）或4℃孵育30分钟至过夜，全程避光操作。反应时间需根据标记效率动态调整，可通过荧光光谱监测反应进程。
摩尔比控制：染料与PSMA配体的摩尔比建议1:5至1:20，确保高标记效率及低非特异性结合。过量染料可通过透析或凝胶过滤层析去除。
纯化与表征：
反应后需通过透析（截留分子量3.5kDa）、凝胶过滤层析（如Sephadex G-25）或HPLC纯化，纯度需≥95%。
通过UV-Vis光谱（Cy3特征吸收峰550nm）、质谱、核磁共振验证结构与荧光性能，确保标记效率及信号稳定性。
三、实验设计与应用验证
细胞实验：
使用PSMA阳性细胞（如LNCaP）与阴性对照（如PC3），37℃避光孵育30-60分钟，PBS洗涤3-4次去除未结合探针。
通过流式细胞术、共聚焦显微镜验证靶向特异性，结合PSMA抑制剂（如2-PMPA）进行阻断实验，确认信号特异性。
活体成像：
近红外发射波长570-590nm（Cy3荧光窗口），适用于小动物活体成像、肿瘤靶向检测及纳米载体修饰。
需控制注射剂量（通常≤10nmol/kg），监测肝肾功能，避免高剂量毒性。
多模态成像：
可与放射性核素（如⁶⁸Ga）、MRI造影剂或量子点偶联，构建荧光-PET/CT或荧光-MRI双模态探针，提升肿瘤定位精度及诊疗一体化能力。

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