霉菌转接不同于细菌、酵母等,其固体斜面和平板培养物多为菌丝体,用传统的划线方法很难将菌丝挑起,并且接种效果差。
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因此,霉菌固体转接通常采用切块法。切块转接需要的工具有:①接种铲、②接种锄。
平板传代培养
1.将接种铲和接种锄用酒精棉擦拭干净,风干后在酒精灯外焰前后上下翻转灼烧10s,放置冷却;
2.打开试管,将试管口边缘灼烧一圈;用冷却的接种锄在试管中,相距0.5cm切两条平行线(与试管垂直);
3.用冷却的接种铲在两条平行线之间,相距0.5cm切两条平行线(与试管平行),形成0.5×0.5cm2的正方形菌块;
4.接种铲直接插入菌块底部挑起,平放到新的平板(固体琼脂表面)上;
5.平板正置放入培养箱,如无特殊要求,培养温度25-28℃;
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注意:切块要干净利落,勿重复切割,使菌丝严重受损,影响转接效果。
液体摇床培养
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1.准备生长旺盛的新鲜平板培养物一个;
2.根据上述方法切块,6-8块/(装液100mL/250mL)、3-4块/(装液40mL/100mL),置于三角瓶中,用八层纱布封口,摇床培养;
3.如无特殊要求,培养温度25-28℃;根据菌球大小需要,调节转速,一般转速越大,形成菌球越小,菌液越浑浊;转速越小,菌球越大,菌液越澄清。
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