FITC-鼠李糖酸B，FITC-Lithospermic acid B的合成路径与关键步骤

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产品名称：FITC-鼠李糖酸B，FITC-Lithospermic acid B的合成路径与关键步骤
1. 核心结构与偶联机制
FITC荧光特性：异硫氰酸荧光素（FITC）通过异硫氰酸酯基团（-N=C=S）与鼠李糖酸B的氨基或羧基发生亲核取代反应，形成稳定的硫脲键或酯键连接，赋予分子黄绿色荧光（激发波长495 nm，发射波长520 nm）。
鼠李糖酸B（丹酚酸B）：分子式C₃₆H₃₀O₁₆，分子量718.62，属于丹参提取物中的多酚类化合物，含多个羟基、羧基及芳香环结构，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等生物活性。其多酚骨架可与FITC共价结合，保留原有生物活性。
偶联策略：常用EDC/NHS活化鼠李糖酸B的羧基，或通过DBCO-N₃点击化学实现无铜偶联，提升生物相容性。反应需在弱碱性（pH 8.0-9.0）避光条件下进行，避免荧光淬灭。
2. 合成路径与关键步骤
方案一：EDC/NHS活化酰胺化法
步骤：
鼠李糖酸B溶于无水DMF，加入EDC（1.2 eq）和NHS（1.2 eq），室温搅拌30分钟活化羧基。
加入FITC溶液（1 eq），氮气保护下反应12-24小时，pH控制在8.0-8.5。
透析（截留分子量3.5 kDa）或HPLC纯化，去除未反应试剂，产物纯度≥95%。
优势：反应条件温和，产物稳定性高，适合规模化合成。
方案二：点击化学无铜偶联
步骤：
鼠李糖酸B引入叠氮基（-N₃），FITC修饰DBCO基团。
DBCO-FITC与叠氮化鼠李糖酸B在无氧环境中反应，生成三唑环连接产物。
优势：生物正交性良好，避免金属催化剂毒性，适合活体应用。
3. 物理化学特性与生物活性
荧光特性：黄绿色荧光信号稳定，适合常规荧光显微镜、流式细胞术检测。荧光强度受pH、离子强度及微环境极性影响，可用于研究代谢状态变化。
溶解性与稳定性：
水溶性通过PEG链修饰优化，避免疏水聚集；需避光保存（-20℃），添加抗坏血酸防止荧光淬灭。
多酚结构赋予抗氧化能力，但高浓度可能对细胞产生毒性，需优化浓度范围。
生物活性保留：标记后仍保持鼠李糖酸B的抗氧化、抗炎活性，可用于追踪其在细胞内的分布及代谢路径。

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