近日,安徽农业大学韦朝领团队在Nature Communications期刊发表题为“Pangenome analyses of tea plants reveal structural variations driving gene expression alterations and agronomic trait diversification”的研究成果。安徽农业大学茶树种质创新与资源利用全国重点实验室陶玲玲博士研究生,朱俊彦、胡建兵副教授和中国农科院深圳农业基因组研究所徐琦老师为共同第一作者,安徽农业大学韦朝领、夏恩华、宛晓春教授和中国热带农业科学院周永锋研究员为共同通讯作者。
研究团队利用HiFi测序技术,组装了5个栽培茶树和1个野生近缘种(大理茶)的参考基因组,结合16个公共数据库公布的基因组,构建了覆盖栽培种和野生近缘种的高质量泛基因组,该泛基因组共有15,216个核心基因家族,占其总基因家族的35.1%。系统发育分析显示,野生茶树与栽培茶树约在5.71百万年前分化,而栽培茶树中的大叶种、小叶种及白毛茶变种形成了清晰的遗传分支。
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茶树泛基因家族和核心基因家族特征分析
分析发现,茶树基因组中存在137万余个结构变异,其中存在/缺失变异(PAVs)是最主要的变异类型,且这些变异显著影响了基因表达水平,其中栽培种相较于野生近缘种的上调基因主要富集于与风味(如类黄酮、氨基酸代谢,萜类物质生物合成)和环境适应性相关的通路,提示这些结构变异在驯化过程中对茶叶品质形成具有重要作用。
通过选择清除分析发现花青素合成酶基因ANS3启动子区域的结构变异,该区域存在3种单倍型:Hap1携带192bp插入,主要存在于野生近缘种;Hap2为缺失型(丢失192bp和283bp插入),主要存在于大叶种;Hap3携带283bp的插入,主要存在于小叶种,说明在茶树栽培驯化过程中Hap1逐渐丢失,而在栽培型的大叶种和小叶种中则经历了从Hap2向Hap3的转变。进一步的功能验证表明,野生近缘种中特有的192bp插入能够显著增强ANS3启动子活性,进而提高ANS3表达水平,使其花青素含量明显高于栽培种,这解释了野生近缘种茶树芽梢呈现紫色的原因。
分析发现栽培种相比野生种获得了更多的抗病相关基因,且野生近缘种茶树的CtLRR1基因启动子区域存在一个159bp插入,与栽培茶相比,该插入显著上调了野生近缘种茶树中LRR1的表达水平,而LRR1的低表达明显提高了茶树对炭疽病菌的抗性,说明LRR1是一个免疫反应的负调控因子。这一发现提示:茶树在栽培驯化过程中,通过LRR1启动子区域丢失159bp的插入而获得对炭疽病更高的抗性。
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LRR1启动子变异对茶树抗炭疽病的影响
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