Alexa Fluor 350 Hydrazide的优势与对比

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产品名称：Alexa Fluor 350 Hydrazide的优势与对比
1. 生物医学应用场景
细胞标记与成像：
活细胞追踪：通过显微注射、膜片钳电极灌流或细胞摄取诱导剂进入细胞，实现细胞器（如高尔基体）、代谢物（如丙酮酸、酮体）的实时成像。
糖蛋白/聚糖标记：特异性标记细胞表面糖蛋白或多糖（如肿瘤细胞糖基化修饰），追踪其从内质网到细胞膜的运输路径，适用于肿瘤研究。
多色标记：与DAPI等染料兼容，利用大斯托克斯位移减少信号串扰，适配流式细胞术、共聚焦显微镜及超分辨成像（如STED/STORM）。
代谢通路研究：
标记含羰基的代谢物（如糖酵解中间产物、酮体），动态监测代谢途径（如糖尿病模型中肝脏组织丙酮酸含量变化，高脂饮食组酮体生成速率提升2.3倍）。
分子检测与传感器：
结合链霉亲和素-生物素系统，构建高灵敏度生物传感器（如ELISA、微流控芯片），检测整合素表达、肿瘤标志物或药物代谢产物。
用于RNA/DNA末端标记，通过与氧化后的3'端醛基反应，实现寡核苷酸荧光标记。
2. 优势与对比
性能优势：
光稳定性显著优于荧光素类染料，荧光强度高，背景干扰低。
与DAPI光谱相似但斯托克斯位移更大，可直接用DAPI滤片组成像，兼容性佳。
低分子量（350 Da）使其膜不可渗透，需通过主动摄取或注射进入细胞，减少非特异性标记。
对比其他染料：
相比Alexa Fluor 488/594等，350 nm激发/445 nm发射更适合紫外/蓝色通道，避免近红外染料的串扰。
与Cy系列染料相比，水溶性更优，且无需铜催化反应，降低毒性。
3. 合成与使用注意事项
合成路径：通过磺酸化修饰增强水溶性，酰肼基团经EDC/NHS活化后与生物分子（如蛋白质、核酸）共价偶联，或通过点击化学（如CuAAC）引入。
反应优化：腙键可经氰基硼氢化钠还原为稳定结构，避免逆反应；需控制pH（如中性条件）和温度以确保标记效率。
安全与储存：需严格避光、干燥保存，操作时佩戴防护装备；涉及有毒试剂（如氰基硼氢化钠）时需采取安全措施。

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