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实验室多硫酸糖胺聚糖含量分析检测

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糖胺聚糖(GAGs)是天然存在的酸性多糖,由重复的二糖单元组成。每个单位含有一个己糖胺和一个己糖或一个己糖醛酸。根据其单糖成分、糖苷键和硫酸化模式,GAGs通常分为四种类型:透明质酸(HA)、硫酸软骨素(CS)/硫酸皮肤素(DS)、硫酸乙酰肝素(HS)/肝素(HP)和硫酸角质素(KS)。


透明质酸是最简单的糖胺聚糖,由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰葡萄糖胺组成。多硫酸糖胺聚糖(sGAG)是糖胺聚糖(GAGs)的一个重要亚类。除了透明质酸(唯一非硫酸化GAG),其他GAGs均含有硫酸基团,这些硫酸基团通过酯键连接在糖环的特定位置赋予sGAG强负电荷、高亲水性和酸性特性,使其在细胞外基质中起润滑、缓冲和细胞信号传导作用。

sGAG的硫酸化模式(如硫酸基的数量和位置)直接影响其生物活性,例如肝素的抗凝血功能或硫酸软骨素在软骨中的结构支持作用。由于糖胺聚糖含有许多硫酸根而带阴电荷,所以易为碱性染料着色,带阳电荷的特殊染色剂如铜翠蓝,对其尤显特别强的亲和力,是实验室常用的半定量方法。

想要知道具体是哪一类糖胺聚糖时则需要更精准的检测方式,例如从组织/细胞中提取GAG或蛋白多糖,用特异性酶切,通过液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)方法,该方法对大部分亚型GAGs检测的灵敏度和特异性。不同检测分析方法各有优缺点,确认方式时需根据具体需求和实验条件进行选择。


GAGs在各种生理和病理过程中发挥重要作用,已经报道了许多具有潜在定制生物医学应用的大量硫酸化GAG多糖,这些应用通常基于合适的化学(和化学酶)衍生程序来修饰天然多糖结构,研究结果被广泛应用于各类药品、化妆品和保健食品中。建立准确、快速、敏感且特异性的特定GAG测定方法对于定制生物医药,组织工程软骨、体液、细胞培养材料、组织等相关研究具有重要意义。


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