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产品名称:CAS:150810-69-8,6-TAMRA-SE的合成与操作规范
1. 核心应用场景
生物标记与成像:
蛋白质/肽链标记:用于免疫荧光、流式细胞术、Western blot,追踪蛋白质定位、相互作用及动力学(如酶活性研究)。
核酸标记:结合氨基修饰的寡核苷酸,用于FISH(荧光原位杂交)、实时定量PCR、DNA测序(传统荧光团之一)。
细胞成像:在荧光显微镜下观察细胞内分子分布、动态追踪(如细胞器标记),光稳定性支持长时间实验。
探针与FRET体系:作为能量受体/供体构建荧光探针,用于分子间相互作用研究(如蛋白质-蛋白质/DNA相互作用)、传感器设计及FRET(荧光共振能量转移)实验。
药物与基因递送:偶联抗体、靶向肽段实现肿瘤靶向递送,或标记纳米载体(如脂质体)用于基因治疗。
2. 合成与操作规范
合成路径:6-羧基四甲基罗丹明与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)在活化剂(如EDC/NHS)作用下反应,经层析法纯化去除未反应原料。
操作要点:
溶解与反应:需在无水有机溶剂(DMSO/DMF)中溶解,避免水解;反应后通过透析、凝胶过滤或色谱去除未结合试剂。
储存与使用:分装后-20℃避光保存,避免反复冻融;操作时需干燥环境,佩戴防护装备(手套、护目镜)。
3. 性能优势与挑战
优势:
高特异性:NHS酯与氨基的高效共价结合,确保标记稳定性。
荧光性能:明亮橙红色荧光,低背景噪声,适合多色标记实验。
生物相容性:罗丹明类染料在生物体内代谢稳定,毒性较低。
挑战与解决方案:
水解问题:通过无水溶剂和快速反应减少水解;使用前干燥处理。
背景信号:优化标记条件(如pH、时间)并纯化样品,降低未反应试剂残留。
毒性控制:高浓度可能引起细胞毒性,需通过浓度优化或PEG化修饰降低毒性。
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