Cy5-Wheat Germ Agglutinin：高灵敏度的糖识别荧光探针解析

Cyanine5-WGA（Cy5标记小麦胚芽凝集素）
一、基本描述
Cyanine5-WGA（Cy5-Wheat Germ Agglutinin，Cy5标记小麦胚芽凝集素）是一种将近红外花青染料 Cyanine5（Cy5） 共价连接至 小麦胚芽凝集素（WGA） 分子的荧光糖识别探针。WGA是一类来源明确、特异性识别 N-乙酰-D-葡糖胺（GlcNAc） 与 唾液酸（Sialic acid） 的Ⅱ类凝集素，广泛用于研究细胞表面糖基化修饰、胞外基质组成、黏蛋白结构以及肿瘤组织中糖链重塑现象。Cy5是一种近红外区荧光染料，其信号背景噪声低，适用于复杂组织和活体生物的深层成像。因此，Cy5-WGA兼具凝集素糖识别优势与高灵敏近红外荧光成像能力，是糖生物学、肿瘤微环境、神经科学和黏附分子研究中非常重要的荧光分析工具。

二、化学性质
Cyanine5-WGA由蛋白质与荧光染料共价连接而成，通常通过WGA的赖氨酸残基与Cy5活化酯反应形成稳定酰胺键或通过巯基-马来酰亚胺点击化学形成硫醚键。Cy5典型光谱参数为：
激发峰（λ_ex）：约 646–650 nm
发射峰（λ_em）：约 662–670 nm
Cy5属于近红外荧光染料，能有效减少组织本底自发荧光，提升信噪比，适用于共聚焦显微镜、流式细胞仪和活体成像设备。WGA结构稳定，能够与含GlcNAc和唾液酸的糖基形成可逆非共价结合，适用于细胞固定样本和活细胞实验。
Cy5-WGA应避光并在低温环境中保存，建议储存条件：
–20℃保存，避免反复冻融
可用含甘油PBS或Tris缓冲液配制储液
长期储存需避光和低氧环境以降低光漂白
三、制备方法
Cy5-WGA的合成通常采用蛋白质荧光标记策略，主要路线包括 NHS酯法 和 Maleimide点击法 两类：
（1）NHS活化酯偶联法
1）将Cy5-NHS ester溶解于无水DMSO或DMF；
2）在碳酸盐或HEPES缓冲液中调整WGA溶液pH至7.5–8.5；
3）按适当摩尔比加入Cy5-NHS并孵育数小时，使其与赖氨酸侧链ε-NH₂发生酰胺键连接；
4）通过凝胶过滤层析（SEC）或HPLC纯化去除游离染料；
5）使用UV-Vis、SDS-PAGE与标记度计算确认偶联效率。
（2）巯基-马来酰亚胺点击化学
适用于预先引入巯基的WGA变体：
Cy5-Maleimide + WGA-SH → 形成稳定硫醚键，具有更高结构保留性与方向性标记。
用途：科研
状态：固体/粉末/溶液
保存：冷藏
供应：西安齐岳生物科技有限公司
以上资料由西安齐岳生物小编whl提供，仅用于科研
同系列：
FMOC-Lys(QSY-21)-OH
DABCYL-DBCO
PerCP-Cy5.5 Tandem
FITC-Palmitate Conjugate
FMOC-Lys(QSY-7)-OH
PerCP-iFluor 700
PerCP-iFluor 710
PerCP-Cy7
PerCP-iFluor 780
Hoechst 33342 maleimide
Hoechst 33342 alkyne
FITC-xtra maleimide