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Sulfo-Cyanine3 cadaverine的合成路径

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产品名称:Sulfo-Cyanine3 cadaverine的合成路径
核心反应机制与合成路径
NHS酯偶联法(主流路径)
原料准备:使用Sulfo-Cyanine3 NHS酯(如Lumiprobe产品)与cadaverine(1,5-戊二胺)作为反应物。
反应条件:在无水DMSO中,将Sulfo-Cyanine3 NHS酯溶于500μL DMSO,逐滴加入含50μL cadaverine的DMSO溶液,室温搅拌5分钟。
沉淀与纯化:反应液倒入15mL 5%甲酸乙酸乙酯溶液中,沉淀物经离心收集,通过反相HPLC纯化(流动相:10mM三乙基铵乙酸盐pH7.0 + 乙腈梯度洗脱),产物经旋转蒸发干燥后溶于DMSO备用。
关键优势:NHS酯与氨基的高效酰胺化反应,产率>85%,产物水溶性良好,适用于生物标记。
点击化学辅助路径(可选)
炔烃-叠氮环加成:若Sulfo-Cyanine3经修饰为炔烃衍生物(如Sulfo-Cyanine3 alkyne),可与叠氮化cadaverine在CuAAC条件下(CuSO₄/抗坏血酸钠)偶联,形成1,2,3-三唑结构,避免金属残留需后续脱盐纯化。
无铜点击化学:采用DBCO-Sulfo-Cyanine3与叠氮化cadaverine的SPAAC反应,提升生物相容性,适用于活细胞标记。
关键步骤优化与注意事项
溶剂选择:无水DMSO或DMF保证NHS酯稳定性,避免水解副反应;酸性乙酸乙酯促进沉淀分离。
温度控制:室温反应平衡效率与产物稳定性,高温可能导致染料降解。
纯化策略:HPLC梯度洗脱(乙腈比例0-100%)有效分离未反应试剂与副产物,三乙基铵乙酸盐缓冲液维持离子强度。
储存条件:产物需避光、-20℃干燥保存,避免反复冻融导致NHS酯活性丧失。
结构验证与功能表征
结构验证:通过¹H NMR确认cadaverine的亚甲基信号(δ=1.5-1.7 ppm)与Sulfo-Cyanine3的芳香质子特征峰;MALDI-TOF质谱测定分子量(Sulfo-Cyanine3≈700-800 Da + cadaverine≈102 Da)。
荧光性能:Ex/Em=548/563 nm(橙黄色荧光),量子产率>0.3,光稳定性良好,适用于共聚焦显微镜成像。
生物活性:保留cadaverine的氨基活性位点,可进一步与生物素、抗体或靶向肽偶联,实现多模态生物标记。


我们可以提供的产品
DOPE 1,2-二油酰-SN-甘油-3-磷酰乙醇胺
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