品名:RPE-Cy5-链霉亲和素偶联物
英文名称:RPE-Cy5-streptavidin conjugate
用途:科研
一、基本描述
RPE-Cy5-链霉亲和素偶联物是一种多功能荧光标记蛋白复合物。链霉亲和素(streptavidin)能高亲和力结合生物素(biotin),是常用的生物标记工具;R-Phycoerythrin(RPE)和Cy5是两种红色/近红外荧光染料,通过偶联形成复合荧光信号。该偶联物集成了高灵敏度荧光检测和特异性生物素结合能力,适合免疫学、分子生物学及流式细胞术中的双重标记和信号放大。
二、化学性质
RPE-Cy5-streptavidin 水溶性良好,蛋白质骨架赋予其稳定性,但对强酸、强碱或高温敏感。RPE提供强烈红色荧光(激发约565 nm,发射约575 nm),Cy5提供近红外荧光(激发约650 nm,发射约670 nm),偶联后荧光信号稳定。该复合物通过蛋白-蛋白和染料-蛋白的共价结合制备,荧光猝灭风险低。
三、制备方法
首先将RPE蛋白与Cy5活性衍生物(如Cy5-NHS酯)在碳酸盐缓冲或PBS中反应,形成RPE-Cy5偶联物。随后,通过EAS(活性酯)或马来酰亚胺化学方法与链霉亲和素偶联,保证生物素结合位点保留。反应结束后,可用透析、凝胶过滤或柱层析纯化,去除未反应的染料和副产物,获得稳定的荧光偶联复合物。
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