PE-Cy7 Tandem：应用于流式细胞术和荧光成像的串联染料

品名：PE-Cy7 Tandem，PE-Cy7串联染料
用途：科研
一、基本描述
PE-Cy7是一种广泛应用于流式细胞术和荧光成像的串联染料（Tandem Dye），由藻红蛋白（Phycoerythrin, PE）和氰ine 7（Cy7）两个荧光基团通过共价连接形成。PE作为激发染料，能够吸收激光能量后将能量通过共振能量转移（FRET）传递给Cy7，从而发出远红光荧光信号。PE-Cy7的激发波长一般为488 nm或561 nm，发射峰位于约780 nm波段，具有较长的波长和较低的背景噪声，适合多色流式分析中远红光通道的检测。该染料具有亮度高、光谱重叠小、信号强等优点，是多色荧光标记的重要选择。
二、化学性质
分子结构：PE-Cy7串联染料包含大分子蛋白质PE与小分子荧光染料Cy7通过稳定的共价键偶联而成。PE是一种高度水溶性的蛋白质，Cy7为光谱在近红外区域发射的荧光染料。
溶解性：PE-Cy7水溶性良好，常溶于PBS或流式细胞术缓冲液。
稳定性：PE-Cy7对光敏感，易被强光照射导致荧光淬灭，需避光保存；在4°C条件下稳定性较好，冷藏保存可维持数月。
荧光特性：激发波长488/561 nm，发射波长约780 nm，发射峰宽且强度高。
pH适应性：适应中性至弱碱性环境，极端pH条件下可能影响荧光性能。

三、制备方法
PE-Cy7染料的制备通常采用化学偶联反应，将PE蛋白上的氨基或巯基与活化的Cy7染料基团连接。
首先纯化高纯度的PE蛋白，确保其生物活性和荧光性能。
Cy7染料经活化处理，通常以NHS酯形式存在，便于与PE上的氨基形成稳定的酰胺键。
在适宜的缓冲体系中（pH 7.4–8.0），将PE和Cy7-NHS按照一定摩尔比混合反应，控制偶联程度，避免过度标记引起自发淬灭。
反应结束后通过透析或凝胶过滤去除游离染料，纯化得到高质量PE-Cy7串联染料。
进一步检测荧光特性和结合活性，确保批次间稳定性。
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