品名:Fura-10 AM(钙离子荧光探针)
用途:科研
一、基本描述
Fura-10, AM 是一种膜可渗透型的钙离子荧光探针,属于Fura系列探针的一种改进版本。它可在细胞内酯酶作用下水解为带有羧酸基的Fura-10游离酸,从而滞留在胞质中用于钙离子检测。该探针最*的特点是具有双波长比率检测能力,通过在340 nm 和 380 nm 两个激发波长下进行比值成像,可有效消除染料浓度不均、细胞厚度或光照强度波动带来的误差,从而实现更高精度的胞内Ca²⁺浓度测量。
相比经典的Fura-2,Fura-10具有更高的荧光灵敏度、更强的钙结合能力,以及更好的细胞保留性,尤其适用于对信噪比要求更高的活细胞钙离子动力学研究。
二、化学性质
分子形式:Fura-10为羧酸型荧光钙离子指示剂,其AM酯形式具细胞膜通透性
激发波长:钙结合时 ~340 nm;未结合时 ~380 nm
发射波长:约510 nm(钙结合与否共用)
钙亲和力(Kd):约225 nM,适用于大多数细胞内钙浓度动态范围
水解机制:酯酶作用下AM酯转化为游离酸,荧光活性显著增强
膜通透性:AM形式可被活细胞吸收,不需透化处理
三、制备方法
Fura-10, AM 通常由Fura-10游离酸与氯甲酸异丙酯类化合物反应,制备成酯化衍生物。
合成流程包括:
选择性保护反应位点,避免干扰荧光核心;
与AM酯源在有机溶剂中反应生成四酯化产物;
纯化通过HPLC进行分离,并经NMR和MS确认结构与纯度;
产品以冻干粉形式提供,可溶于DMSO作为储备液使用。
以上资料由小编whl提供,仅用于科研
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