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Streptavidin,碱性磷酸酶和链霉亲和素-CF 680R的功能特性

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一、物质定义与中英文名称​​
​​中英文名称1:Streptavidin,碱性磷酸酶 链霉亲和素-碱性磷酸酶
中英文名称2:Streptavidin,CF 680R 链霉亲和素-CF 680R
​​二、功能特性与应用场景​​
由于偶联分子的功能不同,二者的应用方向存在显著分野。
(一)SA-AP:基于酶促反应的信号放大与检测
碱性磷酸酶的核心功能是催化底物发生磷酸水解反应,这一特性使其成为免疫检测、分子杂交等技术中的“信号放大器”。
检测原理​​:当SA-AP与生物素标记的靶标(如抗体、核酸探针)结合后,加入特异性底物(如5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐/氮蓝四唑盐,BCIP/NBT)可触发酶促反应。BCIP被磷酸水解后生成不溶性的蓝紫色沉淀(5,5'-二溴-4,4'-二氯靛蓝),而NBT作为电子受体被还原为蓝紫色甲臜沉淀,最终通过肉眼或酶标仪观察显色强度,实现对靶标浓度的定量分析。
​​典型应用​​:酶联免疫吸附试验(ELISA)中,SA-AP常作为二抗标记物,用于检测血清中的抗原(如肿瘤标志物、病原体抗体);Western Blot中,SA-AP标记的二抗可结合膜上的生物素化一抗,通过显色反应可视化目标蛋白条带;此外,在原位杂交(ISH)技术中,SA-AP可用于标记生物素化的核酸探针,通过显色定位细胞或组织中的特定DNA/RNA序列。
(二)SA-CF 680R:基于荧光信号的多重检测与成像
CF 680R的核心功能是通过吸收特定波长的激发光(通常为650-670 nm),发射更长波长的荧光(约680 nm),实现高灵敏度的荧光检测或成像。
检测原理​​:当SA-CF 680R与生物素标记的靶标结合后,可通过荧光显微镜、流式细胞仪或荧光定量仪检测其发射的荧光信号。由于CF 680R的发射波长位于近红外区域(650-700 nm),可穿透生物组织的散射干扰,适用于深层组织成像;同时,其荧光强度与链霉亲和素的结合量正相关,可用于定量分析靶标浓度。
​​典型应用​​:流式细胞术中,SA-CF 680R标记的生物素化抗体可结合细胞表面抗原,通过流式细胞仪检测荧光强度,实现对细胞亚群的定量分析;荧光原位杂交(FISH)中,SA-CF 680R标记的生物素化探针可结合细胞内特定核酸序列,通过荧光显微镜观察目标基因的定位与拷贝数;此外,在多重荧光免疫组化(mIHC)中,CF 680R可与不同波长的荧光染料(如FITC、Cy5)搭配使用,实现同一组织切片中多种靶标的同步检测。



产地:西安瑞禧生物
用途:科研
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