品名:AF/XFD 405-Tetrazine,AF405 四嗪
用途:科研
一、产品描述:
AF405 四嗪是一种以Alexa Fluor 405(简称AF405)为荧光核心、在其结构上引入反应性四嗪(Tetrazine)基团的荧光探针。AF405 属于短波长蓝光激发的高亮度荧光染料,具有较高的量子产率与光稳定性,而四嗪基团则是生物正交反应中经典的亲双烯反应活性位点。两者结合,使AF405 四嗪兼具荧光成像功能和高度反应性,尤其适用于快速、无铜的点击反应(如与转烯基团反应)进行活体生物标记与功能分子连接。
二、化学性质
AF405发射波长约在421 nm左右,具备较低背景干扰与良好的水溶性,适合细胞成像等水相环境。引入的四嗪结构可与转烯类(如TCO, BCN, Norbornene等)迅速发生反应,生成稳定的二氮杂双环结构。这种反应速率快、选择性高,不受生物环境干扰,因此特别适用于活细胞与组织环境中的标记反应。
该染料结构常包含极性连接臂(如PEG linker),进一步提高其水溶性与生物相容性。其常见形式为蓝紫色固体或溶于DMSO的储备液,适合长期储存。
三、制备方法
AF405 四嗪的合成通常包括两步关键反应:
AF405与氨基反应物的连接:使用AF405活性酯(如NHS酯)与带有氨基的四嗪前体发生缩合反应,生成中间产物;
后修饰与纯化:若四嗪结构需进一步稳定化或功能化,可能需进行额外保护或脱保护反应,之后通过HPLC纯化获得高纯度AF405 四嗪产物。
整个过程在惰性气氛与低光照条件下进行,以保护四嗪结构的稳定性。
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