白果内酯的提取方法有以下几种:
- 溶剂萃取法:一般先将银杏叶等原料粉碎,然后用合适的溶剂提取。如用乙醇等有机溶剂加热回流、浸泡,使白果内酯溶解到溶剂中,过滤除去杂质得到提取液。还可利用不同溶剂对白果内酯和杂质溶解性的差异,通过萃取、分液进一步分离,如用乙酸乙酯萃取提取液,使白果内酯转移到有机相,与水相杂质分离。
- 柱提取法:将银杏叶提取物上样到填充特定吸附剂的柱子,如硅胶柱、大孔吸附树脂柱。选择合适洗脱剂洗脱,由于白果内酯与其他成分在吸附剂上吸附能力不同,会在不同洗脱阶段被洗脱下来,实现分离提取。例如用大孔吸附树脂柱时,先用水洗去水溶性杂质,再用不同浓度乙醇溶液梯度洗脱,收集含白果内酯的洗脱液。
- 超临界流体萃取法:常用二氧化碳作超临界流体,将银杏叶原料放入超临界萃取设备,加入适量夹带剂(如乙醇)提高二氧化碳对白果内酯的溶解性,通过控制萃取温度、压力和时间等参数,萃取白果内酯。该方法提取效率高、产品纯度高、无污染,但设备造价高,不利于大规模提取。
- 微波辅助提取法:把银杏叶粉末与溶剂混合后,放入微波提取设备,选择合适的微波功率、提取时间和温度进行提取。与传统方法相比,具有提取速度快、效率高、节省溶剂等优点。
- 超声波辅助提取法:将银杏叶原料与提取溶剂混合后,放入超声波设备中,控制超声波的功率、频率、提取时间和温度等参数进行提取。这种方法可提高提取效率,缩短提取时间,减少溶剂使用量。
- 高速逆流色谱法(HSCCC):这是一种液 - 液色谱,对样品破坏性小,可用于天然产物中活性成分的分离纯化。刘晶等通过流动注射技术实现高速逆流色谱与蒸发光散射检测器一体化,从 500mg 初纯化的银杏内酯中获得 83mg 白果内酯单体,纯度大于 98%。但该方法成本高,制约了大规模生产。
- 配位色谱法:潘见等人建立了白果内酯的配位色谱分离纯化方法。将白果内酯初提物经柱前与配位剂 - 硼砂反应,用盐酸调 pH 后,进行常压硅胶柱层析,用石油醚 - 乙酸乙酯混合溶剂梯度洗脱。该方法较普通色谱法可提高纯度和回收率。
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