浙江
Western Blot（WB）作为分子生物学的经典实验技术，几乎是每一位生物学霸的必修课。它不仅可以检测目标蛋白的表达情况，还能通过条带的强弱、位置等信息，为研究提供关键线索。
不过，WB 实验有时能让你欲哭无泪。今天学霸君整理了一些当代 WB「疯癫」作品集，顺便分享一些经验教训，希望对正在实验室里「摸鱼」的你有所帮助。
类型一：表情包型结果
跑出惊叹号（!）
网友投稿自己的 WB 结果，像一个大大的惊叹号，条带清晰，但一点用没有。这可能是因为蛋白表达量过高，或者上样量过多导致的。
图源：网络
原因——
蛋白上样量过多，导致条带过于集中。
目标蛋白本身表达量过高，掩盖了其他条带。
建议——
适当减少蛋白上样量，或者对样品进行稀释后再上样。
如果目标蛋白本身就高表达，可以尝试降低抗体浓度，避免过度显色。
跑出鬼脸（-V-）
有的结果看起来像是在做鬼脸，条带扭曲、变形，甚至可能出现奇怪的形状。这通常是由于电泳条件不稳定，或者转膜过程中出现问题。
比如，电泳电压过高、时间过长，或者转膜时电流过大，都会让条带变得 「面目全非」。
图源：网络
原因——
电泳电压过高或时间过长，导致条带变形。
转膜时电流过大或转膜时间过长，导致条带扭曲。
建议——
降低电泳电压和时间，确保电泳条件稳定。
在转膜时检查电极方向是否正确，避免电流过大。
使用丽春红 S 染色检测转膜是否完全
类型二：2B 型结果
并不是在骂人哈，而是条带宛如 2B 涂卡笔型，糊成一片，背景高到几乎看不到目标条带，就像是一张被涂黑的试卷，让人无从下手。
图源：网络
原因——
抗体浓度过高，导致非特异性结合增加。
孵育时间过长，背景信号增强。
封闭不充分，膜表面未完全封闭，导致抗体非特异性结合。
建议——
降低抗体浓度，建议进行梯度稀释以找到最佳浓度。
缩短孵育时间，避免过度孵育。
延长封闭时间（建议 1 小时以上），并确保封闭液（如 5% 脱脂奶粉或 BSA）新鲜且均匀覆盖膜表面
类型三：艺术型结果
水墨画
水墨画型结果偶尔会出现，稍显「随性」，条带可能没有那么清晰，但整体效果依然很美，给自己的作品定一个亿的价格不过分吧
图源：网络
原因——
抗体特异性稍差，或样品中存在非特异性蛋白。
建议——
选择特异性更高的抗体，或在样品处理时加入蛋白酶抑制剂。
如果背景仍然较高，可以尝试延长封闭时间或降低抗体浓度。
抽象艺术画
有的结果看起来像是抽象派艺术画作，条带形状奇特、位置不规则，甚至可能出现一个黑色的「大泡泡」。
图源：网络
原因——
转膜时气泡：膜和凝胶之间存在气泡，导致显色异常。
膜或凝胶未充分浸润：局部电流集中，形成显色圈。
缓冲液不足或不均匀：导致局部电流异常。
建议——
排除气泡：转膜前确保膜和凝胶紧密贴合，无气泡。
充分浸润：确保膜和凝胶完全浸润在缓冲液中。
脱气缓冲液：转膜缓冲液使用前脱气处理。
保持湿润：实验过程中避免膜干燥。
优化条件：适当调整转膜时间和电流。
类型四：猫猫型结果
虽然不能用，但很可爱，有两个角角。这种结果可能是由于蛋白降解，或者样品处理不当，导致条带出现奇怪的形状。
图源：网络
原因——
蛋白降解：样品在处理或保存过程中发生降解，导致条带出现碎片化或异常形状。
裂解条件不当：裂解液配方或裂解时间不合适，导致蛋白过度降解或变性。
样品保存不当：样品在保存过程中未保持低温或未添加足够的蛋白酶抑制剂。
建议——
加入蛋白酶抑制剂：在样品裂解时加入适量的蛋白酶抑制剂（如 PMSF、EDTA 等），以防止蛋白降解。
优化裂解条件：调整裂解液配方或裂解时间，确保蛋白在裂解过程中保持稳定。
今天 WB 结果图大赏就到这了，你是否也经历过类似的「艺术级 」WB 结果，以下这些结果你都「解锁」过哪些呢？
速来投票！！
如果你还有其他有趣的结果，也欢迎分享你的「WB 艺术作品」！一起交流经验，早日告别「疯癫」条带，拥抱「梦中情带」！
题图来源：图虫创意
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