为何血常规正常，血涂片却能发现犬猫的潜在疾病？

作者：宠物医师网编委会

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揭秘血液涂片复查的重要性：精准捕捉淋巴细胞微妙变化！

摘要

自动血液分析仪虽常规用于评估淋巴细胞浓度变化（如淋巴细胞减少/增多），但无法可靠检测细胞形态学改变或分类（如大淋巴细胞）。因此，人工血液涂片复查对淋巴细胞精准评估至关重要。本文系统介绍了外周淋巴细胞生理学、淋巴细胞形态学变异以及导致淋巴细胞浓度变化的常见疾病。

一、前言

全血细胞计数（CBC）是基础检查的核心项目，可识别细胞浓度与形态变化，以辅助疾病诊断。自动血液分析仪虽能有效测定细胞浓度，但无法可靠评估形态学改变或细胞分类1。因此，血涂片复查对评估细胞形态及验证仪器定量结果至关重要。本文聚焦淋巴细胞异常（形态及浓度变化为主），如果报告有淋巴细胞增多，应进行血液涂片检查。

血涂片复查指征

✅ 报告显示淋巴细胞增多

✅ 单核细胞增多

✅ 疑似原始细胞（尤其淋巴细胞幼稚化或体积增大）

✅ 白细胞分布异常

观察区域选择：由于涂片的羽状边缘和体可能出现细胞畸变，应在单层区域识别淋巴细胞，若淋巴细胞数量稀少，需检查涂片体部等其他区域，对疑似低比例异常细胞病例，建议对整个涂片进行筛查。

二、淋巴细胞数量

淋巴细胞是外周血主要的单核细胞，承担多种免疫功能，其来源于骨髓干细胞分化的T细胞或B细胞。

T细胞在胸腺发育，然后循环于血液或定植于淋巴结、脾脏等淋巴组织。健康犬猫外周血淋巴细胞以T细胞为主，它们负责细胞介导免疫，包括辅助性T细胞（CD4+）和细胞毒性T细胞（CD8+）。

B细胞的发育场所因物种而异，B细胞在骨髓或特殊的淋巴组织（如回肠淋巴结，法氏囊）中发育。B细胞通过分泌免疫球蛋白（抗体）介导体液免疫。

不表达T/B细胞标记物的细胞群，包括自然杀伤细胞（NK），它们在先天免疫系统中起重要的作用，尤其是抗病毒感染。光学显微镜不能可靠地区分淋巴细胞的不同亚群，但流式细胞术可以识别不同的细胞标记物和受体（免疫表型）。

三、淋巴细胞形态学变化

在评估淋巴细胞的形态特征时，应注意细胞大小以及细胞核和细胞质的质量（方框1）。与中性粒细胞相比，健康犬猫的正常淋巴细胞较小。

小淋巴细胞具有圆形至卵形核，染色质致密团块状，无可见核仁，胞质少至中等量，嗜碱性（图1）。小淋巴细胞应与有核红细胞（nRBCs）区分开来（图1）。用甲醇罗曼诺夫斯基染色比用水溶液快速染色（如DiffQuik）更容易观察到(图2)。

图1：与小型淋巴细胞（箭头所示）相比，有核红细胞（箭头所指）具有更多的细胞质，其颜色与其他红细胞相似，并且在后期阶段，细胞核偏心定位，染色质非常平滑且浓缩。犬血。改良魏氏染色，100倍物镜。

图2：颗粒性淋巴细胞（箭头所示），其细胞质内有精细的品红色颗粒（箭头所指），以及反应性淋巴细胞，其细胞质深嗜碱性（星号所示）。反应性淋巴细胞与抗原刺激相关。犬血。改良魏氏染色，100倍物镜。

反应性改变特征包括胞质量增多，深蓝色染色（偶呈淡蓝）；细胞核边缘不规则或分叶（图2和3）。这些形态学变化提示可能由炎症、感染或其他原因刺激引起，致中、大淋巴细胞轻度增多。中/大淋巴细胞比例显著升高，中等或较大的淋巴细胞，特别是染色质开放和核仁突出的淋巴细胞中至重度扩增，提示淋巴增生性疾病，例如，淋巴瘤/白血病（图4）。

图3：两个大小不同的反应性淋巴细胞，其细胞质深嗜碱性。免疫刺激时可见少量此类细胞。犬血。瑞氏-吉姆萨染色，100倍物镜。

图4：来自一只V期淋巴瘤犬的大型淋巴细胞，其细胞质中度嗜碱性，细胞核略不规则，染色质精细，可见核仁（箭头所示；染色略浅于周围核染色质）。注意，此形态并非淋巴瘤特有，也可能与急性白血病相似。犬血。瑞氏-吉姆萨染色，100倍物镜。

淋巴细胞中发现感染因子较罕见。犬瘟热病毒包涵体可出现在白细胞和红细胞中，包涵体呈圆形或不规则形，有单个或多个包涵体。在水溶性罗曼诺夫斯基染色（如快速染色）中，包涵体呈玻璃样和嗜酸性，但在血液中呈一过性（图5）。犬埃里希体桑椹胚在血液中很少检出，感染急性期主要见于单核细胞，淋巴细胞罕见。桑葚胚呈圆形颗粒状含嗜碱性胞质包涵体，血小板偶尔覆盖淋巴细胞和红细胞；细焦放大是确保物体（即感染性包涵体）与淋巴细胞相关的关键。确诊需结合血小板减少、神经系统症状等临床表现。

（A）

（B）

（C）

图5：一只感染犬瘟热病毒的犬的血涂片。注意红细胞（A）中的紫色细胞质包涵体、一个中性粒细胞（B）中的包涵体，以及一个淋巴细胞（C），箭头所示）中的玻璃样淡嗜酸性包涵体。快速罗马诺夫斯基染色，100倍物镜。

导致淋巴细胞形态变化的先天性和遗传性疾病很少遇到。“溶酶体贮积病”指由溶酶体功能障碍引起的代谢疾病的总称，通常导致神经系统症状。有时，通过光显学微镜可以在中性粒细胞和淋巴细胞中观察到溶酶体及其内容物。在这些情况下，溶酶体及其内容物可以通过清晰的空泡变化或嗜碱性、颗粒状（圆形至杆状）细胞质包涵体来区分。在黏多糖贮积症和GM2神经节苷脂沉积症患者的血液中可见颗粒状包涵体（图6）。

图6：一只患有黏多糖贮积症的犬的血涂片。注意中性粒细胞（箭头所示）和淋巴细胞（星号所示）中的嗜碱性颗粒状细胞质包涵体。瑞氏-吉姆萨染色，100倍物镜。

四、淋巴细胞浓度变化

外周血中粒细胞和单核细胞的浓度通常反映出骨髓的产生与组织中使用之间的平衡（从血液到组织的传播通常是单向的，而无再循环）。相反，淋巴细胞可以在血液和淋巴组织之间循环。有关这些浓度变化的摘要，请参见框2。

五、总结

犬和猫外周血淋巴细胞的形态和浓度变化应与临床发现（例如患者的年龄、感染迹象、近期药物或疫苗接种情况、淋巴组织异常/增大）相关联。淋巴细胞减少通常被记录为皮质类固醇应激反应的一部分。淋巴细胞增多则通常与非特异性抗原刺激（反应性）和淋巴增殖性疾病（如白血病、淋巴瘤）有关。对于淋巴细胞增多的患者，尤其是那些持续存在小到中等大小淋巴细胞数量增多的患者，建议筛查感染源（例如埃氏立克次氏体、猫白血病病毒、猫免疫缺陷病毒）。为了确定淋巴细胞增殖是否为肿瘤来源，建议通过流式细胞术进行免疫分型，并通过抗原受体重排PCR（PARR）进行克隆性检测。

学习要点

◆ 涂片复查的必要性：推荐进行血液涂片复查以确认和补充自动分析仪结果。

◆ 淋巴细胞亚群构成：犬猫外周血淋巴细胞以T细胞为主，混杂B细胞与自然杀伤细胞，这些细胞在光学显微镜下无法区分亚群。

◆ 正常形态特征：健康动物淋巴细胞直径通常小于中性粒细胞。

◆ 淋巴细胞形态变化：免疫激活（反应性）可致中、大型淋巴细胞轻度增多，中至重度淋巴细胞扩增需警惕淋巴系统肿瘤（如淋巴瘤、白血病）。

◆ 淋巴细胞减少原因：淋巴细胞减少症通常与应激有关，但也可能由细胞丢失、裂解、重新分布或免疫缺陷、大剂量类固醇使用导致的细胞生成减少引起。

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文章来源|Today Sveterinary Practice

翻译编辑|张秋雁

审 核|郭羽丽