梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）标准操作程序

1、检验目的

规范梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)操作，确保检验结果准确可靠。

2、检验原理及方法

采用VDRL（性病研究实验室试验）的抗原（类脂质抗原：心磷脂、卵磷脂及胆固醇），混悬于含有特制的甲胺胺红溶液中，与待测血清中反应素反应，在白色卡片上出现肉眼可见的凝集,用以检测血清或血浆中反应素。

3、标本

3.1样品类型：血清

3.2患者准备：标本采集前三天不应饮酒、服用对检测项目有干扰的药物，避免劳累。标本采集前应空腹8-12小时。标本采集前不应剧烈活动，并稍事休息。

3.3容器和添加剂类型：洁净干燥试管或含促凝剂的分离胶真空管

3.4标本存放：样本保存在2-8℃，如需长期保存需置-15℃，并避免反复冻融。为避免标本中水分挥发，使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。已完成测试的标本保持完整的识别号，置2-8℃冰箱中保存7天。

3.5采样后应立即送到检验科，测试前将样品室温平衡30分钟以上，冷冻样品试验前需混匀。

4、设备

水平旋转仪，微量加液器等。

5、试剂

梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）诊断试剂盒组成：1、TRUST抗原悬液 2、阴阳性对照 3、试验专用卡片 4、专用吸管及针头 5、使用说明书。

6、环境和安全

6.1环境

6.1.1本品仅用于体外检测，操作应按说明书严格进行。

6.1.2实验所产生废液排入专用下水道；

6.1.3实验所产生医疗废弃物置于黄色医疗垃圾袋中，并按相关程序文件与卫生员交接；

6.1.5实验室按生物安全等级Ⅱ级要求，注意感染性检测物的消毒灭活。

6.2仪器安全

必须安装在水平,光洁的台面,环境温度15℃-40℃。仪器应放置在无磁场和干扰电压的位置，应避免阳光直射。

6.3人员安全

6.3.1所有样品和废弃物都应按传染源处理， 使用时必须注意安全。

6.3.2检测必须符合实验室管理规范和生物安全守则的规定，严格防止交叉污染，操作时必须戴手套，穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。

6.3.3所有样品和废弃物都应按传染源处理，使用时必须注意安全。

7、校准程序

8、操作步骤

8.1定性试验

8.1.1分别吸取50微升梅毒阳性和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。

8.1.2取待测血清或血浆50微升置于卡片的另一圆圈中。

8.1.3用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂1滴于上述标本中。

8.1.4.每分钟100转摇动8分钟，肉眼观察结果。

8.2定量试验：

标本结果阳性时，将待测血清用生理盐水作倍比稀释，然后按上述定性方法进行试验，以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。

9、质量控制

用试剂盒提供的阴性、阳性对照随每批标本进行测定，以半定量方式记录结果，当阳性对照凝集程序下降“++”时，该试剂即应停用。

10、干扰因素

10.1本试验在23~29℃条件下进行。

10.2TRUST试验的敏感性和特异性有一定的局限性，同时结果为肉眼观察，易出现漏检和误判。因此本试验只适于筛选试验，不适于梅毒的诊断。请结合其他的检查结果以及临床症状进行综合判断。

10.3 TRUST试剂使用前应充分摇匀。

10.4试剂盒内的试剂都是为了产生正确的反应而组合起来的,请务必注意不要将生产批号不同的试剂混合在仪器使用。

11、结果

11.1阳性反应（+++～++++）：可见中等或较大的红色凝聚物。

11.2弱阳性反应：（+～++）：可见较小的红色凝聚物。

11.3阴性反应：可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物。

12、生物学参考区间

正常为阴性。

13、危急值

本项目不纳入危急值管理，但遇到无法解释的异常结果时，应及时与临床沟通。

14、实验室解释

TRUST是一种非梅毒螺旋体抗原试验，可作为常规试验，还可用于大量人群的筛查。TRUST滴度与梅毒活动性相关，可做定量试验，用于观察疗效，判断是否复发或再感染。梅毒病人治疗后TPPA很少发生变化，继续维持阳性。而TRUST可以发生变化，一期、二期梅毒治疗后6个月血清反应滴度可下降至原来的1/4，6个月下降至原来的1/8。一期梅毒1年内转为阴性，二期梅毒2年内转为阴性。如果患者最初血清滴度较高（>1:32），治疗后滴度不下降，则应检查是否为神经梅毒，并予以复治。治疗后血清滴度增加4倍或以上，提示再感染或治疗失败。因此，可用TRUST对病人做疗效观察。