合成生物学研究过程中的诱导剂IPTG残留检测

IPTG（即异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷），分子式C9H18O5S，是一种异乳糖模拟物，能够引起乳糖操纵子的转录过程，诱导乳糖操纵子下游基因对应蛋白的表达，作为诱导剂常用于生物制药、酶催化技术等领域。但由于IPTG不能被细胞代谢，对生物体具有潜在毒性，当利用IPTG诱导表达应用于人体的重组药物时，可能对最终产品带来不利影响。因此，需要控制IPTG在药物(终产品)中的含量。

IPTG是一种半硫代的化合物，由于含硫的化合物分子中缺乏发光基团，无法采用常规的紫外-可见检测器检测，异丙基-α-硫代半乳糖苷等异构体杂质与IPTG在结构和物理化学性质上相似，难以通过常规的分离方法去除。目前常用的IPTG检测方法是衍生化联合荧光的HPLC检测法、离子色谱-脉冲安培检测IC法等。

微源检测实验室查阅法规资料，为了确保某多肽药物的质量控制，特别是在定量限和检出限方面的要求，开发利用液质联用LC-MS法对某多肽药物的中的IPTG残留含量进行检测。将样品加入乙腈溶液稀释液，减少了复杂样品基质的干扰，简化了处理步骤。充分涡旋混匀使蛋白沉淀析出，离心后取上清，得到供试品溶液，将稀释剂乙腈、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液分别注入液相色谱质谱联用仪。

方法制备简便，测试时间短，检出限可达μg，回收率为99.0%~102.0%，相对标准偏差小于6%，准确度，精密度、灵敏度、重复性等符合企业可接受标准，可为生物大分子药物（包括重组蛋白、抗体等）的IPTG残留含量检测，提供了一种新的方法手段，准确定量并评估合成生物学技术过程中的IPTG残留对产品的影响。

多肽药物是药物研究领域的重要组成部分，当选择IPTG作为诱导剂时可促进目的蛋白的大量表达与生产，通过精密分析检测技术对IPTG的残留分析检测，对研发生产中质量控制具有重要意义，液质联用LC-MS法在样品中IPTG的浓度极低，也能被准确检测出来，保证了药物终产品的安全性。

微源检测实验室专注杂质研究，为工艺相关杂质如诱导剂IPTG、筛选剂MSX、抗生素、消泡剂残留、培养基成分等提供分析测试服务，在工艺开发与放大的过程中，帮助医药企业及科研机构完成工艺杂质鉴定，开发建立高灵敏分析方法，制定适合的杂质检测方案。如您有相关分析测试需求，欢迎致电咨询！

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