脑声常谈丨焦虑行为评估顺序及注意事项

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焦虑行为范式是在动物模型中评估焦虑样行为的一系列实验方法。这些范式主要用于研究焦虑的神经生物学基础、行为表型以及潜在的治疗策略。以下是几种常用的行为范式：

1. 旷场测试（Open Field Test, OFT）

原理：测量动物在新环境中探索的倾向，中心区的探索被视为焦虑水平的反比指标。

操作：将动物置于一个空旷的矩形或圆形箱子中，记录一段时间内动物的活动轨迹。

评估指标：中心区的停留时间、边缘区的活动、总活动量等。

大小鼠旷场实验箱，型号：XR-XZ301，上海欣软

2. 高架十字迷宫测试（Elevated Plus Maze, EPM）

原理：利用动物对开放空间的自然恐惧与探索新环境的倾向之间的冲突。

操作：动物被放置在一个由两个封闭臂和两个开放臂组成的十字形迷宫中，记录动物在不同臂中的活动。

评估指标：开放臂的进入次数、在开放臂中的停留时间等。

3. 社交交互测试（Social Interaction Test）

原理：评估动物在面对社交情境时的焦虑水平。

操作：将一只动物放入装有陌生动物的笼子中，记录其社交行为。

评估指标：接近陌生动物的时间、社交接触的频率等。

4. 慢性束缚应激（Chronic Restraint Stress, CRS）

原理：模拟长期的生活压力，通过重复的束缚应激来评估动物的焦虑水平。

操作：每天将动物限制在一个无法移动的容器中一定时间。

评估指标：体重变化、进食行为、行为测试中的焦虑样行为等。

5. 循环捕食者气味应激（Predator Odor Stress, POS）

原理：利用动物对捕食者气味的恐惧反应来评估焦虑水平。

操作：将动物暴露于捕食者（如猫或狐狸）的气味中。

评估指标：在气味存在时的逃避行为、活动水平等。

6. 社会挫败应激（Social Defeat Stress, SDS）

原理：模拟社会挫折经历，通过与攻击性强的动物接触来评估焦虑水平。

操作：将一只弱势动物短暂地与攻击性强的动物同笼。

评估指标：社交回避行为、体重变化、焦虑样行为等。

7. 慢性温和不可预测应激（Unpredictable Chronic Mild Stress, UCMS）

原理：通过一系列轻微但不可预测的压力事件来模拟慢性压力。

操作：实施多种压力源，如限制饮水、噪声暴露等。

评估指标：体重变化、食物摄入量、行为测试中的焦虑样行为等。

8. 足底电击应激（Foot Shock Stress, FSS）

原理：通过施加轻微电击来模拟急性应激。

操作：将动物放置在一个可以施加轻微电击的装置中。

评估指标：电击后的冻结行为、逃避行为等。

9. 强迫游泳测试（Forced Swim Test, FST）

原理：评估动物面对无处可逃的不利环境时的绝望程度。

操作：将动物放置在一个充满水的容器中，记录其挣扎行为。

评估指标：挣扎时间、不动时间等。

10. 黑白箱测试（BlackWhite Box Test, BWBT）

原理：利用动物对明暗环境的偏好差异来评估焦虑水平。

操作：将动物放置在一个分为亮区和暗区的箱子里。

评估指标：暗区的停留时间、转换次数等。

11. 震惊反射实验范式

原理：测量动物对突然声响的反应，以此评估焦虑水平。

操作：记录动物对预设声音的反应强度。

评估指标：惊跳反应的幅度等。

实验注意事项：

适应期：确保动物适应实验室环境。

实验顺序：按照从轻到重的压力顺序进行测试，以减少累积效应。

标准化：确保实验条件（如光照、温度、噪音等）的一致性。

这些行为范式不仅可以单独使用，也可以组合起来以全面评估动物的焦虑样行为。选择合适的行为范式取决于研究的目的和假设。在进行动物焦虑行为范式的评估时，为了确保实验结果的可靠性和有效性，遵循一定的实验顺序是非常重要的。这是因为动物在经历不同的行为测试后可能会出现疲劳或习得性行为改变，这些都可能影响后续实验的结果。以下是一般的建议顺序：

1. 适应性处理：在开始正式的行为测试之前，让动物适应实验室环境，通常至少需要3小时。这有助于减少动物因环境不熟悉而产生的额外焦虑。

2. 初步评估：可以先进行一些基本的行为测试，比如运动能力或一般健康状况的评估，以确保动物适合进行后续的焦虑行为测试。

3. 轻度压力测试：开始时采用较温和的行为测试，例如旷场测试，以评估动物的一般探索行为和运动活性。

4. 逐渐增加压力：接下来可以进行稍微增加压力水平的测试，例如高架十字迷宫测试或高架零迷宫测试，这些测试可以更具体地评估动物的焦虑水平。

5. 特定焦虑测试：进一步进行更具体的焦虑测试，如黑白箱测试或饮水电击测试（Vogel Conflict Test, VCT），这些测试可能会给动物带来更大的压力。

6. 最后的测试：如果计划中还包括其他压力较大的测试，如社会交互测试或强迫游泳测试（Forced Swim Test），这些应该放在最后进行，因为它们可能会给动物带来较高的压力水平，并且可能会影响后续的行为表现。

需要注意的是，每项测试之间最好有一定的间隔时间，以允许动物恢复到基线状态。此外，实验人员应该尽量在所有测试中保持一致的实验条件，比如光照、温度和噪音水平，以减少外界因素对实验结果的影响。遵循从轻到重的压力顺序进行动物焦虑行为测试可以帮助减少动物的压力累积，从而获得更加准确和可靠的实验结果。

文献引用：

• Bourin M, Petit-Demoulière B, Dhonnchadha BN, Hascöet M. Animal models of anxiety in mice. Fundam Clin Pharmacol. 2007 Dec;21(6):567-74.

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