血小板假性升高？这个干扰因素，大多数检验人都想不到！

*仅供医学专业人士阅读参考

外周血涂片也是早期发现病原菌的可行诊断方法之一

撰文 | 陆丹霞

血小板计数是临床实验室常用的血液学检测指标，准确的血小板计数结果对疾病的筛查、诊断、治疗及预后均起着重要的作用。血细胞分析仪是目前检测血小板的主要方式，具有检测速度快、重复性好、准确性高等优点，但也受诸多因素的影响[1]。

本科室在常规工作中发现1例马尔尼菲篮状菌致血小板计数结果假性升高的病例，现报道如下：

案例经过

• 一般资料

患者男，54岁，因“纳差、乏力20余天，咳嗽1天”于2024年5月8日急诊入院。入院查体：体温39.5℃，皮肤黏膜苍白，贫血貌，大便不成型，小便正常，近期体重约下降10kg，两肺呼吸音清晰，两肺闻及少量湿啰音。

• 实验室检查

入院当天查血常规显示，全血细胞计数+五分类：白细胞数目3.6×109/L、中性粒细胞百分比95.7%、淋巴细胞百分比1.9%、单核细胞百分比2.1%、嗜酸性粒细胞百分比0.0%、淋巴细胞数目0.07×109/L、单核细胞数目0.08×109/L、嗜酸性粒细胞数目0.00×109/L、红细胞数目3.26×1012/L、血红蛋白浓度89g/L、红细胞压积26.5%、平均红细胞体积81.3fL、血小板数目37×109/L、血小板压积0.042%。

入院第7天后全血细胞计数+五分类：白细胞数目2.8×109/L、中性粒细胞百分比34.7%、淋巴细胞百分比63.0%、单核细胞百分比2.1%、嗜酸性粒细胞百分比0.0%、红细胞数目3.21×1012/L、血红蛋白浓度84g/L、红细胞压积25.3%、平均红细胞体积78.8fL、血小板数目87×109/L，纠正后为21×109/L、血小板压积0.065%，详细结果见下图。

外周血培养出马尔尼菲篮状菌，人类免疫缺陷病毒抗体Anti-HIV（化学发光法）人类免疫缺陷病毒抗原和抗体HIV感染待确定。细胞形态学显示，白细胞数量减少，部分细胞吞噬疑似马尔尼菲篮状菌，可见散在分布的疑似马尔尼菲篮状菌。

分析入院第8天的血常规检测未纠正前结果，血小板数目87×109/L，未触犯复检规则，但血小板直方图右下曲线翘尾呈轻度锯齿状，笔者怀疑有小红细胞干扰血小板计数，仪器没有血小板相关报警，散点图异常，有三系减少、原始细胞？异常淋巴细胞/原始细胞？核左移？有核红细胞的报警。

本次血小板计数采用电阻抗法（PLT-I），根据仪器报警及血小板两次结果相差较大且直方图异常，决定对标本进行复查，分别进行涂片瑞氏染色镜检和采用光学法（PLT-O）进行检测。

涂片瑞氏染色，油镜下可见散在的血小板，1-2个/HP，但可见散在分布的疑似马尔尼菲篮状菌，3-4个/HP，部分细胞吞噬疑似马尔尼菲篮状菌，如下图所示。白细胞数量减少，粒细胞核左移，粒细胞有中毒颗粒、核浆发育失衡、有核红细胞，更换采用光学法（PLT-O）网织红通道进行检测后，血小板数量为21×109/L，与手工镜检结果相一致。

案例总结

血小板生理性增多常见于妊娠中后期、运动、高原反应及使用一些药物等情况，而病理性增多常见于血液疾病、急性化脓性感染、脾切除术后等情况。

目前大部分实验室检测血小板计数的主要方法是电阻抗法，电阻抗法的检测原理是当不同的检测颗粒通过检测孔时会形成脉冲，脉冲振幅越高，体积越大，脉冲数量越多，检测颗粒数量越多。故电阻抗法仅仅是根据颗粒的大小来区分血小板，这个检测方法的缺点是容易受到小红细胞、红细胞碎片、乳糜颗粒的影响，导致血小板计数结果假性增高。同时，大血小板、微血小板、血小板聚集的情况也容易导致计数结果假性降低。但随着技术的不断发展，血小板计数的方法也有独特的发展，用荧光染色技术检测可以有效的排除干扰，得到准确的血小板数量。

本案例，笔者通过推片手工镜检发现疑似马尔尼菲篮状菌后，手工计数的同时也用荧光染色技术方法对该标本重新检测，两种方法的计数结果一致，最后血小板计数纠正为21×109/L。

作为一名检验人员，掌握仪器的实验原理十分重要，对于需要复检的标本，不仅仅只是重新再测一次或者重新采一次血样，更换检测方法学在这个案例上更为重要。在审阅血常规结果时，不仅要查看每项具体数据，更应该结合血常规的散点图、直方图、报警信息等做相关的复验复核，以确保检验结果的准确性。

知识拓展

马尔尼菲篮状菌曾被命名为马尔尼菲青霉菌[2]，属于细胞内寄生真菌，在东南亚地区和我国南方，马尔尼菲篮状菌是艾滋病患者最常见的机会性感染病原菌之一[3]。

马尔尼菲篮状菌容易导致播散性感染，侵犯全身多个器官，病情凶险，死亡率高。目前，临床上公认的诊断金标准是真菌培养，根据其具有双相性，可通过菌落形态、真菌酵母转换相及显微镜下形态进行菌株鉴别[4]。虽然血液、骨髓、皮损的真菌培养阳性率很高，但是培养时间较长，无法满足临床快速诊断的需求，新的诊断技术如PCR技术、基因芯片、血清Mplp抗原检测等在一定程度上具有很高的敏感性和特异性，但由于人员资质、操作繁琐等原因未能在临床中广泛应用。

有相关文献报道，在疑似马尔尼菲篮状菌播散感染时，可以利用血涂片吉姆萨-瑞氏染色实现对马尔尼菲篮状菌感染的诊断。马尔尼菲篮状菌吉姆萨-瑞氏染色后，镜下形态为类圆形、长圆形或腊肠形，大小不一，2-8μm，细胞膜不甚清楚，有1-2个紫红色小核，浆淡蓝色[5]。

本病例的外周血涂片中白细胞数量减少，可见粒细胞吞噬1-3个菌体，细胞外也可见散在的菌体，菌体大小不一，呈类圆形、腊肠形、长圆形，部分具有横隔，胞壁着色欠清晰，浆淡蓝色，有1-2个紫红色小核，吞噬菌体的粒细胞体积较大，易在低倍镜下快速发现。观察到病原菌被吞噬在细胞内，对鉴别病原菌和污染菌的判断有重要价值。

本病例外周血涂片结果比培养结果提早了1-2周，提示外周血涂片也是早期发现病原菌的可行诊断方法之一。实验室人员在对艾滋病患者进行血常规分析时，通过对异常散点图的筛查、血涂片的形态辨认，可对AIDS合并马尔尼菲篮状菌播散感染进行快速诊断，有助于该病得到及时治疗，降低死亡率。

参考文献：

[1] 田麦,李卉.血细胞分析仪测定血小板假性升高的原因及 探讨[J].中国医疗前沿,2012,7(20):54.

[2] Samson R A , Yilmaz N , Houbraken J ,et al.Phylogeny and nomenclature of the genus Talaromyces and taxa accommodated in Penicillium subgenus Biverticillium[J].Studiesin in in Mycology, 2011, 70(1):159-183.DOI:10.3114/sim.2011.70.04.

[3] 梁欣,柳明波,李春玫.获得性免疫缺陷综合征合并血流感染143例临床及病原菌分析[J].中国感染与化疗杂志, 2016, 16(3):5.DOI:10.16718/j.1009-7708.2016.03.003.

[4] 鹆昕,高丽,张米,等.艾滋病合并马尔尼菲篮状菌病的研究进展[J].中国真菌学杂志2018, 13(6):5.DOI:CNKI:SUN:ZJXZ.0.2018-06-017.

[5] 莫武宁，邓卓霖，甘宝文，等.用糖原染色鉴别骨涂片中马尔尼菲青霉菌、荚膜组织胞浆菌及黑热病杜利小体口.临床检验杂志，2002,20（4）：228-229.

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本文来源丨检验医学网

责任编辑丨舒豪

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