FDA全面解读：行业指南《关于控制人用药物中亚硝胺杂质》

近日，FDA 发布了《控制人用药物中的亚硝胺杂质》指南的更新版本，同2021年2月发布的同一标题的指导意见相比，这次修订包括一个新的部分，描述了亚硝胺药物物质相关杂质(NDSRIs ，nitrosamine drug substance-related impurities) ，NDSRIs潜在的根本原因、对应亚硝胺杂质的检测、风险评估和缓解策略等。

其中该指南指出亚硝胺杂质一般有两种：小分子亚硝胺杂质（即与 API 结构不相似的亚硝胺杂质）和亚硝胺原料药相关杂质 （NDSRI），它们与 API 具有结构相似性，并且通常对每种 API 都是独一无二的。该指南建议活性药物成分（API）和药品制造商采取的检测步骤以及防止药品中亚硝胺杂质含量超出可接受水平。

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重点关注
亚硝胺原料药相关杂质NDSRI

自2018年以来，FDA 一直在调查某些药物产品中亚硝胺杂质的存在，在血管紧张素 II 受体、阻断剂、组胺 -2阻断剂(雷尼替丁和尼扎替丁) ，抗糖尿病药物(二甲双胍和西格列汀) ，抗生素(利福平和利福喷丁) 和戒烟类药物（伐伦克林）等均发现了亚硝胺的存在。

与一般的亚硝胺不同，NDSRI 对药物的活性药物成分 （API） 具有特异性，当 API 与药物辅料中存在的亚硝酸盐杂质等亚硝化剂相互作用时，就会形成 NDSRI。鉴于 NDSRI 形成杂质的独特可能性，需要针对每个特定 API 进行专门的风险评估。

风险评估应包括与原料药制造商合作，以帮助识别原料药的活性氧或原料药制造的其他工艺条件，这些条件会使药物产品面临亚硝胺杂质的风险。

风险评估还应包括评估在药品制造或储存过程中可能引起亚硝胺形成风险的任何途径(例如，降解和亚硝胺前体杂质，如二甲胺或其他次级胺前体)。如果适当的风险评估确定不存在亚硝胺杂质的可能性，则没有必要采取进一步行动。

查看微源检测公众号往期文章：《技术分享|NDSRI药物基质亚硝胺杂质控制策略和分析方法研究》中有对此类亚硝胺的检测方法研究展开技术分享和评估策略。

对制造商的影响

⇲ 除了对小分子亚硝胺的现有评估外，制造商现在还必须对 NDSRI 进行单独的风险评估。

⇲ 由于NDSRI针对每种API都是特定的，制造商面临着越来越复杂的问题，可能需要采用新的策略来检测和控制这些杂质。

⇲ 识别和缓解NDSRI需要与辅料供应商持续合作以监测亚硝化剂，同时还要投资开发更先进的分析技术。

⇲ NDSRI在定量检测过程中，对应的杂质标准品难以获得，需要花费更多的时间和成本。

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药品中亚硝胺杂质的控制

该指南对制造商如何控制亚硝胺杂质给了如下建议：

⇲ 建立原料药供应商的可靠性--根据21CFR 211.84的要求，药品制造商和申请者在使用前必须对所有进口成分(包括大量高风险原料药)的代表性样品进行检测。为符合21 CFR 211部分(E 部分)的现行《优良制造规范》(CGMP)规定，并符合 ICH 的《行业 Q10药品质量体系指引》(2009年4月) ，药品制造商和申请人应继续测试每个原料药批次的亚硝胺杂质，直至他们确认原料药供应商能持续生产在其有效期或重新测试日期内符合建议认可标准限值的原料药。

如果亚硝胺杂质在原料药有效期内出现变化或上升趋势，可能导致含量超出可接受的限度，则应继续进行测试。此外，当确定的亚硝胺杂质包括在原料药规格和制造商依赖供应商的亚硝胺测试结果分析证书，供应商的分析的可靠性必须在适当的时间间隔进行验证。

⇲ 制定合适药品规范--如果检测到亚硝胺杂质超出限量标准，制造商或申请人应制定策略，确保亚硝胺水平保持在建议的认可限量范围内。如确认测试发现药物产品中的亚硝胺杂质含量超出建议AI限值的10%，包括在有效期届满时的稳定性样本中的亚硝胺杂质含量，控制策略应包括该药物产品中已确定的亚硝胺杂质的规格限值。

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重新配方策略的引入

该指南再次强调了调整配方以减少亚硝胺的形成，譬如其建议制造商：

⇲ 使用供应商资格认证程序筛选赋形剂，用亚硝酸盐含量较低的替代辅料重新配制药物产品；

⇲ 通过设计添加抗氧化剂(如抗坏血酸(维生素 C)、抗坏血酸盐(如抗坏血酸钠)、 α-生育酚或没食子酸丙酯) 可以抑制药物产品中NDSRI的形成（最近的研究表明，在制剂中加入少量的抗氧化剂可以显著抑制药物产品中 NDSRI 的形成）；

⇲ 在制剂中将微环境改变为中性或碱性pH值。NDSRIs的形成通常发生在酸性条件下; 在中性或碱性环境中，这些反应的动力学显著降低。因此，加入辅料(例如碳酸)将微环境改变为中性或碱性pH的配方设计可以抑制NDSRI的形成。

对制造商的影响

对于制造商而言，制造商可能需要重新调整现有药品，以加入抗氧化剂或pH调节剂，尤其是对于高风险 API，同时配方改良可能需要进行新的生物等效性研究，以确保维持改良后产品的有效性和安全性。但是，在某些情况下，FDA允许豁免体内生物等效性测试，前提是进行适当的溶出度比较研究。配方改良也会带来新的研发成本，以及监管障碍，因为制造商必须向FDA提交配方改良的变更以供审查。

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亚硝胺杂质的风险评估和测试要求

指南强调了更全面和定期的风险评估过程。现在，制造商需要同时评估小分子亚硝胺和 NDSRI，并要求在不同条件下进行测试，例如制造和储存过程中。

例如，在原料药或原料药片段可能通过亚硝化生成亚硝胺杂质的情况下，以FDA 在亚硝胺指南网页中确定的NDSRI为例，制造商或申请人可以在风险评估中证明，使药物经过亚硝化条件(即有针对性的强制降解)不会在药物产品中形成亚硝胺杂质。在这些情况下，遗漏确认测试可能是合理的风险评估。

⇲ 如果确认测试显示亚硝胺含量不超过建议AI限值的10% ，那么只要能够充分了解根本原因，并建立和验证制造过程控制，就不需要订入标准(方法和验收标准)。

⇲ 如确认测试显示亚硝胺含量超出建议AI限值的10% ，但仍在建议AI限值范围内，则应在释放及稳定性规范中订入对亚硝胺的管制。对于获得批准的药品，应在30天将这些信息作为变更的补充信息提交。

⇲ 如确认测试显示亚硝胺水平超出建议的AI值，则制造商及申请人需要更改配方、制造工序或包装，制造商及申请人应实施已证明的更改，以确保亚硝胺水平维持在建议的可接受认证限度之内。

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重新部分亚硝胺AI值的变更

结合CDER发布的亚硝胺杂质可接受摄入量限值（更新中）以及EMA/517258/2023，Acceptable intakes (AIs) established for N-nitrosamines中对亚硝胺限值的更新文件，部分常见的亚硝胺通过致癌性分类方法（CPCA）来计算AI值后，对原有的AI值进行了修订。

如NDIPA、NEIPA和NMBA从原来一致AI值为26.5 ng/day，分别更新为1500 ng/day、400 ng/day和1500 ng/day。

此次指南中对亚硝胺杂质的更新为制药商带来了新的复杂性，但它也为应对 NDSRI 等新出现的风险提供了更明确的指导方针。凭借更精确的可接受摄入量限值计算方法、新的重新配制策略和全面的风险评估框架，该行业现在拥有了确保药品安全又最大限度减少亚硝胺污染的工具。

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亚硝胺等基因毒性杂质检测

√ 实验室积累丰富基因毒性杂质研究经验，完结亚硝胺等百余项基因毒性杂质检测项目。包括但不限于：N-亚硝基二甲胺(NDMA)、N-亚硝基二乙胺(NDEA)、N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸(NMBA)、N-亚硝基二异丙胺(NDIPA)、乙基异丙基亚硝胺(NEIPA)、N-亚硝基二正丁胺(NDBA)等。

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