Byabscience小鼠IL-6 ELISA试剂盒定量检测原理及操作流程

南京博研生物科技有限公司（Byabscience）的小鼠白细胞介素6 (IL-6) ELISA试剂盒是一种用于定量检测小鼠血清、血浆、细胞培养上清液等样本中IL-6含量的试剂盒。以下是该试剂盒的说明书概要：

产品名称

小鼠白细胞介素6 (IL-6) ELISA试剂盒

检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）进行定量检测。具体步骤如下：

1. 预包被抗体：微孔板上预包被有特异性捕获小鼠IL-6的抗体。
2. 样本加入：将待测样本加入微孔板中，样本中的IL-6与预包被抗体结合。
3. 洗涤：去除未结合的成分。
4. 检测抗体加入：加入酶标记的特异性检测抗体，该抗体与已结合在微孔板上的IL-6结合。
5. 再次洗涤：去除未结合的酶标记抗体。
6. 底物加入：加入显色底物（TMB），酶催化底物产生蓝色产物。
7. 终止液加入：加入终止液，终止反应，蓝色产物变为黄色。
8. 读数：在450 nm波长下用酶标仪读取吸光度值。

检测范围

0-1000 pg/mL

样本准备

• 血清：室温静置30分钟，3000 rpm离心10分钟，取上清。
• 血浆：使用EDTA或肝素作为抗凝剂，3000 rpm离心10分钟，取上清。
• 细胞培养上清液：1000 rpm离心5分钟，取上清。

实验步骤

1. 准备标准品和样本：按照说明书稀释标准品和样本。
2. 加样：将标准品和样本分别加入预包被抗体的微孔板中，每孔100 μL。
3. 孵育：室温下避光孵育90分钟。
4. 洗涤：用洗涤液洗板5次，每次30秒，最后拍干。
5. 加检测抗体：每孔加入100 μL酶标记的检测抗体，室温下避光孵育60分钟。
6. 再次洗涤：用洗涤液洗板5次，每次30秒，最后拍干。
7. 加底物：每孔加入100 μL TMB底物溶液，室温下避光孵育15分钟。
8. 加终止液：每孔加入50 μL终止液，终止反应。
9. 读数：在450 nm波长下用酶标仪读取吸光度值。

注意事项

1. 安全操作：避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2. 实验环境：实验应在清洁、无尘的环境中进行，避免污染。
3. 样本保存：样本应保存在-20°C条件下，避免反复冻融。
4. 试剂保存：所有试剂应保存在2-8°C条件下，避免冷冻。

结果计算

1. 标准曲线：根据标准品的吸光度值绘制标准曲线。
2. 样本浓度：根据标准曲线计算样本中IL-6的浓度。

储存条件

• 试剂盒：2-8°C保存，有效期6个月。
• 标准品：-20°C保存，避免反复冻融。

客户支持

如果您在使用过程中遇到任何问题，建议联系南京博研生物科技有限公司的客户服务部门，获取专业的技术支持和咨询服务。