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雄性和雌性基因敲除(KO)、野生型(WT)以及纯合野生型小鼠进行了多项社交辨别任务,每个测试包括在竞技场中15分钟的适应期,竞技场对角线上放置空的三角形室,随后实验小鼠进行5分钟的感兴趣任务(接触)。
在社交偏好(SP)任务中,实验小鼠分别接触到一个成年的新型群养雄性小鼠(社交)和一个乐高玩具(物体),分别位于竞技场对角线上的单独室中。在性别偏好(SxP)任务中,实验小鼠接触到新型成年雄性和雌性刺激动物。在压力社交偏好(ESPs)任务中,实验小鼠接触到一个通过15分钟限制在有空气开口的50毫升Falcon管中而受到压力的新型刺激动物,以及一个非压力刺激动物。在压力社交隔离(ESPi)任务中,实验小鼠接触到新型群养和社交隔离(1-2周)的刺激动物。每个隔离的刺激动物用于两个不连续的测试。所有测试中使用的所有刺激动物都是新型成年C57BL/6J小鼠。在自由社交互动(FSI)任务中,实验小鼠与同性别、年龄相匹配的新型群养刺激动物自由互动5分钟。
Fig1 Cntnap2基因敲除(KO)和WT小鼠表现出受损的情绪状态偏好(ESP)行为
Fig2 Cntnap2基因敲除雄性小鼠在情绪状态偏好(ESPi)和性别偏好(SxP)任务中表现出特定的缺陷
在FSI任务中使用深度学习软件DeepLabCut来追踪小鼠和刺激物的位置。DeepLabCut是一种基于深度学习的动物行为分析工具,它可以追踪和估计动物在视频中的姿态和位置,无需使用物理标记。在每一帧中,研究者标记了小鼠(主体)和刺激物的以下身体部位:左耳、右耳、鼻子、颈部、躯干、右侧、左侧、尾基部和尾中部。DeepLabCut软件的使用减少了手动标记的需要,提高了行为分析的效率和准确性。
在自由互动期间行为包括:Sniff_StimBody、Sniff_Stim_Anogenital、Being_sniffed、NosetoNose、Aggressive、Moving、Sit_Idle和Grooming。行为定义如下:
Sniff_StimBody:主体嗅闻刺激物的身体,包括整个身体,但不包括头部和肛门生殖区。
Sniff_Stim_Anogenital:主体嗅闻刺激物的肛门生殖部分,包括躯干以下的任何区域。
Being_Sniffed:刺激物嗅闻主体的任何部分,但不包括头部。
NosetoNose:主体和刺激物互相嗅闻对方的面部/头部区域。
Aggressive:主体表现出攻击性行为,如咬、摇尾巴、试图骑乘刺激物,以及用后爪抓住刺激物的尾巴。
Moving:主体在场地内移动,无论是否有刺激物存在。
Sit_Idle:主体坐在非运动状态下,无论刺激物在场地内的位置如何。
Grooming:主体用前爪或后爪梳理或抓挠自己的身体和脸部区域。
文献引用:
Mohapatra, A.N., Jabarin, R., Ray, N. et al. Impaired emotion recognition in Cntnap2-deficient mice is associated with hyper-synchronous prefrontal cortex neuronal activity. Mol Psychiatry (2024).
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