云南
绵羊末端补体复合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA试剂盒
试剂盒性能
1. 特高：由于是抗原的特结合，因此试验的特很高，能够排除其他的。
2. 灵敏度高：由于酶的放大作用，使得试验的灵敏度大大，能够检测出微量的抗原或。
3. 操作简便：ELISA试验操作相对简单，容易，适合于大规模样本检测。
4. 适用范围广：可以用于检测各种抗原、和等生物分子。
样品收集、处理及保存
1. ：使用不含热原和内的试管，操作中避免任何细胞，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将和红细胞迅速小心地分离。
2. ：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。
洗板：手工洗板：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此数次。 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验中。
实验原理
试剂盒采用双一步夹心法酶联吸附试验（ELISA）。往预先包被相关指标的的包被微孔中，依次加入标本、品、HRP标记的检测，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
操作步骤
1)涂层:微孔板的孔涂上捕获或抗原。
2)封闭:孔内加入封闭剂(如牛白蛋白或羧纤维素)，非特蛋
白质结合。
3)样本添加:加入含有未知浓度的目标抗原或的样本。
4)洗涤:去除未结合的。
5)检测添加:加入对特定抗原有特的酶标记检测。
6) 再次洗涤:再次去除未结合的检测。
7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物产生颜色变化。
8)终止反应:加入终止溶液停止酶的反应(在某些类型的ELISA中需要)。
9) 读数:使用光谱光度计测定每个孔的吸光度(通常是在特定波长下)，吸光度
与样本中抗原或的浓度成正比。
ELISA （Enzyme-Linkedimmunosorbent assay）的基础是抗原或的固相化及抗原或的酶标记。这一的基本原理是：①使抗原或结合到某种固相载体表面，并保持其活性。②使抗原或与某种酶连接成酶标抗原或，这种酶标抗原或既保留其活性，又保留酶的活力。在测定时，把待测样本（测定其中的或抗原）和酶标抗原或按不同的步骤与固相载体表面的抗原或起反应。用洗涤的使固相载体上形成的抗原复合物与其他分开结合在固相载体上的酶量与标本中受检的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检的量直接相关，所以可根据颜色反应的深浅定性或定量分析。由于酶的催化速率很高，所以可地放大反应效果，从而使测定达到很高的度。
标本的采集及保存
1.：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2.：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3.细胞物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 (注：标本溶血会影响**检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。)
结果分析
根据试剂盒提供的品浓度及对应的OD值，利用品绘制的曲线，计算待测样品的浓度。一般采用拟合曲线法或直线回归法进行数据处理，通过计算待测样品的浓度。
免责声明
试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或生物体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担， 本公司概不负责。
严格按照说明书操作，不同批号不可交换使用，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
双夹心：本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病（IBDV）的双夹心ELISA为例介绍本法的操作程序。① 加包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干③ 加酶标 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 15分钟，加终止液⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。
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