《食品科学》：大理大学姜燕副教授等：余甘子冻干粉对急、慢性高尿酸血症小鼠的降尿酸及肝肾保护作用

高尿酸血症（HUA）是一种由嘌呤代谢异常引起的以血清尿酸水平异常升高为特征的常见代谢性疾病。目前，HUA的治疗以饮食调节和药物治疗为主。余甘子主要化学成分为鞣质类、酚酸类、黄酮类、萜类、甾醇类、维生素类、挥发油类。研究证明黄酮类、酚酸类、萜类、生物碱类等化合物具有良好的降尿酸作用。余甘子可能具有抗HUA的功效，但对于其能否在体内发挥抑制XOD和腺苷脱氨酶（ADA）活性及其降尿酸作用潜在机制的研究尚有限。

课题组前期研究发现，‘ 盈玉’‘热农1号’和野生余甘子品种中，野生余甘子药用价值最高。故大理大学公共卫生学院的李瑞婷，何维、姜燕等以野生余甘子为研究对象，将其冷冻干燥、低温研磨得到冻干粉，探讨野生余甘子冻干粉（PEFP）对次黄嘌呤引起的急性HUA和氧嗪酸钾诱导的慢性HUA小鼠的降尿酸及肝肾保护作用，以期为食药物质、功能食品及天然降尿酸药物的开发提供实验基础和理论依据。

01

PEEP对次黄嘌呤致急性HUA小鼠的影响

1.1 PEFP对急性HUA小鼠肝/肾系数的影响

KM雄性小鼠随机分为6 组：正常对照组（NC），模型对照组（MC），余甘子冻干粉低（75 mg/kg m b ，PEFP-L）、中（150 mg/kg m b ，PEFP-M）、高剂量组（300 mg/kg m b ，PEFP-H），以及ALLO组（20 mg/kg m b ）。

如表1所示，MC组小鼠相较于NC组的肝/肾系数均极显著升高（P＜0.01），说明腹腔注射次黄嘌呤可引起小鼠肝脏和肾脏肿大，急性HUA造模成功。PEFP组小鼠相比MC组肝/肾系数均显著降低（P＜0.05、P＜0.01），PEFP-H小鼠肝/肾系数最低，且PEFP-M和PEFP-H组的肝/肾系数均与NC组无显著差异（P＞0.05），PEFP对降低小鼠肝/肾系数的效果呈剂量依赖性。初步判断PEFP可缓解次黄嘌呤诱导的急性HUA小鼠的肝肾损伤。

1.2 PEFP对急性HUA小鼠血清尿酸、CRE和BUN水平的影响

如图1A显示，KM小鼠给予次黄嘌呤后，血清尿酸浓度较NC组极显著增加了28.04%（P＜0.01），表明急性HUA小鼠造模成功；相较于MC组，PEFP低、中、高剂量组小鼠血清尿酸浓度分别降低了10.22%、19.71%（P＜0.01）、14.64%（P＜0.05），即PEFP-M组尿酸水平最低，且与NC组水平最为接近，表明150 mg/kg mb PEFP是下调次黄嘌呤所致急性HUA小鼠血清尿酸水平的最优剂量。

由图1B、C可知，MC组小鼠血清CRE和BUN浓度较NC组均极显著升高（P＜0.01），即次黄嘌呤诱导的HUA小鼠肾功能受到损伤。而灌胃不同剂量PEFP的HUA小鼠相比MC组血清CRE和BUN浓度均不同程度降低，且灌胃300 mg/kg mb PEFP（PEFP-H组）降低血清CRE和BUN浓度效果最好（P＜0.01），提示小鼠血清CRE和BUN水平与给药剂量相关，呈剂量依赖性。推测PEFP可改善次黄嘌呤所致急性HUA小鼠的肾脏损伤。

1.3 PEFP对急性HUA小鼠血清AST和ALT活力的影响

由图2可知，MC组小鼠血清AST和ALT活力均极显著高于NC组（P＜0.01），即腹腔注射次黄嘌呤可导致小鼠肝脏功能损伤。灌胃PEFP的HUA小鼠血清AST和ALT活力均较MC组不同程度降低，提示PEFP能抑制血清AST和ALT活力，从而缓解由次黄嘌呤所致急性HUA小鼠的肝脏损伤。

1.4 PEFP对急性HUA小鼠血清及肝脏XOD和ADA活力的影响

如图3所示，MC组小鼠血清和肝脏的XOD和ADA活力均较于NC组极显著升高（P＜0.01）。与MC组相比，各给药组均可极显著降低血清和肝脏XOD和ADA活力（P＜0.01），提示PEFP能显著抑制由次黄嘌呤引起的急性HUA小鼠血清及肝脏XOD和ADA活力的升高，PEFP可能通过抑制XOD和ADA活力发挥降尿酸作用。

1.5 急性HUA小鼠的肾脏组织病理变化

如图4所示，NC组小鼠肾组织形态结构正常，肾小球大小正常，结构清楚，未见炎细胞浸润等明显病理改变。MC组相比于NC组，肾小球明显萎缩，肾间质水肿，肾小管明显扩张伴上皮细胞水肿，可见炎细胞浸润。ALLO组和PEFP各剂量组相比于MC组肾脏组织病理改变均得到不同程度改善，ALLO组肾小管明显扩张，但肾小球萎缩减轻；PEFP各剂量组肾小球萎缩和肾小管上皮细胞水肿明显减轻。表明腹腔注射次黄嘌呤可诱导小鼠肾损伤，而灌胃PEFP可明显改善小鼠肾损伤。

1.6 急性HUA小鼠的肝脏组织病理变化

如图5所示，NC组小鼠肝脏组织结构清晰，肝细胞大小正常，排列整齐，未见明显病理学改变。MC组相较于NC组，中央静脉周围肝细胞明显水肿，可见脂肪变性。与MC组相比较，ALLO组肝细胞轻度水肿，脂肪变性减轻；PEFP-L组肝细胞轻度脂肪变性，少许淋巴细胞浸润，偶见点状坏死；PEFP-M和PEFP-H组肝细胞轻度水肿，可见脂肪变性。提示次黄嘌呤可致HUA小鼠轻微肝损伤，灌胃PEFP可一定程度缓解肝损伤。

02

PEEP对氧嗪酸钾致慢性HUA小鼠的影响

2.1 PEFP对慢性HUA小鼠肝/肾系数的影响

由表2可知，MC组较NC组小鼠肝/肾系数极显著升高（P＜0.01），表明腹腔注射氧嗪酸钾可能导致小鼠肝脏和肾脏损伤。灌胃PEFP的HUA小鼠较MC组肝肾/系数均显著降低（P＜0.05、P＜0.01），PEFP-H小鼠肝/肾系数最低，且PEFP-M和PEFP-H小鼠肝肾系数接近NC组（P＞0.05）。表明灌胃不同剂量的PEFP均可下调小鼠的肝/肾系数，且效果与给药剂量呈正相关，实验结果与PEFP对急性HUA小鼠的干预效果一致。

2.2 PEFP对慢性HUA小鼠血清尿酸、CRE和BUN水平的影响

如图6A显示，腹腔注射氧嗪酸钾14 d后，MC组小鼠血清尿酸浓度较NC组显著增加了81.79%（P＜0.01），说明造模成功；与MC组相比，PEFP低、中、高剂量组小鼠血清尿酸浓度分别降低32.97%、38.99%、43.60%，表明PEFP可极显著降低由氧嗪酸钾诱导的慢性HUA小鼠血清尿酸水平（P＜0.01），从而缓解小鼠的HUA。PEFP对慢性HUA小鼠降尿酸效果优于其对急性HUA小鼠的干预效果，且对慢性HUA小鼠的降尿酸效果表现出剂量依赖性。

如图6B、C所示，MC组小鼠血清CRE和BUN浓度均较NC组极显著增加（P＜0.01），表明氧嗪酸钾导致慢性HUA小鼠肾脏损伤。灌胃不同剂量的PEFP可有效降低慢性HUA小鼠血清CRE和BUN浓度，从而改善慢性HUA导致的肾损伤。与对急性HUA小鼠干预效果不同的是，PEFP对慢性HUA小鼠血清CRE和BUN水平干预效果无剂量依赖性，这与长时间灌胃高剂量PEFP可能会造成小鼠肾功能一定程度的损伤有关。

2.3 PEFP对慢性HUA小鼠血清AST和ALT活力的影响

由图7可知，MC组小鼠血清AST和ALT活力相比NC组极显著增高（P＜0.01），提示由氧嗪酸钾诱导的慢性HUA小鼠肝功能损伤。灌胃不同剂量的PEFP均可显著降低慢性HUA小鼠血清AST和ALT活力，且呈剂量依赖性，表明PEFP可有效抑制小鼠血清AST和ALT活力，从而改善慢性HUA小鼠的肝损伤。PEFP虽可有效下调急性HUA小鼠血清AST和ALT活力，AST活力的降低呈剂量依赖性，但ALT活力的下降并无剂量依赖性。

2.4 PEFP对慢性HUA小鼠血清及肝脏XOD和ADA活力的影响

如图8所示，MC组小鼠血清和肝脏组织中XOD和ADA活力均较NC组极显著升高（P＜0.01），说明腹腔注射氧嗪酸钾可增加小鼠体内XOD和ADA活力，从而促进尿酸的生成。灌胃不同剂量的PEFP小鼠血清和肝脏组织中XOD和ADA活力均呈剂量依赖性降低，表明PEFP可有效抑制慢性HUA小鼠血清和肝脏组织中XOD和ADA活力。推测PEFP可能通过抑制慢性HUA小鼠的XOD和ADA活力发挥降尿酸作用，且与给药剂量呈正相关。而对于急性HUA小鼠，PEFP对ADA活力的降低作用存在剂量依赖性，对XOD活力的影响无剂量依赖性。

2.5 慢性HUA小鼠的肾脏组织病理变化

如图9所示，NC组小鼠肾脏组织学无明显异常，细胞排列整齐，肾小管和肾小球大小正常，未见明显病理变化。MC组相较于NC组肾小管严重扩张，肾小管上皮细胞水肿，部分肾小球明显萎缩。与MC组相比较，ALLO组和PEFP各剂量组病理变化情况得到不同程度的改善，ALLO组肾小管明显扩张，肾小管上皮细胞水肿减轻，肾小球萎缩减轻，可见炎细胞浸润；PEFP各剂量组肾小管扩张和肾小球萎缩均明显减轻，未见炎细胞浸润。提示腹腔注射氧嗪酸钾可诱导慢性HUA小鼠明显肾损伤，灌胃PEFP可明显缓解小鼠肾损伤。

2.6 慢性HUA小鼠的肝脏组织病理变化

如图10所示，NC组小鼠肝细胞形态结构正常，肝细胞大小正常，结构清晰，未见明显病理改变。MC组小鼠相比于NC组肝细胞明显水肿伴脂肪变性，可见点状坏死，大量淋巴细胞浸润。与模型组相比，ALLO组小鼠肝细胞水肿明显伴脂肪变性；PEFP-L和PEFP-M组小鼠肝细胞未见明显异常；PEFP-H小鼠肝细胞明显水肿。表明氧嗪酸钾可诱导慢性HUA小鼠明显肝损伤，灌胃PEFP可明显改善小鼠肝损伤。

本研究采用次黄嘌呤建立急性HUA模型，以氧嗪酸钾诱导慢性HUA模型，采用化学诱导剂建立HUA模型具有稳定、简便和可重复的特点。两种模型小鼠的MC组血清尿酸浓度均极显著升高，表明造模成功，而灌胃不同剂量的PEFP可有效降低两种模型的血清尿酸浓度，提示PEFP具有改善HUA作用。

余甘子富含没食子酸、槲皮素、芦丁、黄酮、多酚、鞣质和VC等活性成分，研究表明槲皮素可能通过抑制肝脏中XOD和ADA活力减少尿酸的生成，从而降低血尿酸。余甘子总黄酮对大鼠佐剂性关节炎有一定的干预作用。故推测余甘子总黄酮及槲皮素可能为其抗HUA的活性成分，其具体作用机制有待进一步研究。

本实验结果也表明，各剂量PEFP可显著降低急性和慢性HUA小鼠血清和肝脏组织XOD和ADA活力。由此可推测各剂量PEFP在体内可能通过抑制XOD和ADA活力，阻碍尿酸的合成途径，减少尿酸的生成，从而发挥降尿酸作用。本研究两种模型中MC组较NC组血清CRE、BUN、AST和ALT水平及肝/肾系数均极显著升高（P＜0.01），表明急性和慢性HUA对小鼠的肝肾功能产生损伤；PEFP各剂量组相比于MC组血清CRE、BUN、AST、ALT水平及肝/肾系数均不同程度地降低，说明PEFP对急性和慢性HUA小鼠的肝肾功能有保护作用。同时病理组织学观察发现，PEFP可明显减轻急性HUA小鼠的肾小球萎缩和肾小管上皮细胞水肿，可一定程度缓解肝细胞水肿和脂肪变性；明显减轻慢性HUA小鼠的肾小管扩张和肾小球萎缩以及炎细胞浸润，较好改善肝细胞水肿和脂肪变性。因此推测PEFP可能通过缓解小鼠肾损伤，从而促进尿酸的排泄，发挥降尿酸功效，且对HUA所致的肝肾损伤有一定保护作用。

综上所述，PEFP可能通过抑制XOD和ADA活力降低急性和慢性HUA小鼠血清尿酸浓度，也可能因改善小鼠肾功能从而促进尿酸排泄，发挥降尿酸作用，同时对肝肾损伤有保护作用，其具体作用机制及有效作用成分还需进一步研究。余甘子有望成为改善HUA的功能食品和治疗药物，本研究结果为野生余甘子的开发利用提供了新的思路。

本文《余甘子冻干粉对急、慢性高尿酸血症小鼠的降尿酸及肝肾保护作用》来源于《食品科学》2023年44卷第15期156-164页，作者：李瑞婷, 何维, 宋贺, 谢小亭，吴杰，姜燕。DOI:10.7506/spkx1002-6630-20220913-112。点击下方阅读原文即可查看文章相关信息。

实习编辑：美娟；责任编辑：张睿梅。点击下方阅读原文即可查看全文。图片来源于文章原文及摄图网。