民族药理-昆明植物所&华西：雷公藤可预防自身免疫性肝炎

微科盟原创微文，欢迎转发转载。

导读

雷公藤片（TWT）广泛用于治疗类风湿关节炎等自身免疫性疾病。雷公藤红素是TWT中的一种主要活性成分，已被证明具有多种有益作用，包括抗炎、减肥、抗癌和免疫调节。然而，TWT是否能预防刀豆蛋白A（Con A）诱导的肝炎仍不清楚。本研究旨在探讨TWT对Con A型肝炎的保护作用，并阐明其潜在机制。我们采用代谢组学、病理分析、生化分析、qPCR和免疫印迹分析等方法以及构建Pxr-null小鼠模型。结果表明，TWT及其活性成分雷公藤红素对Con A诱导的急性肝炎具有保护作用。血浆代谢组学分析显示，与Con A诱导的胆汁酸和脂肪酸代谢相关的代谢紊乱被雷公藤红素逆转。雷公藤红素使肝脏中的衣康酸水平升高，我们推测其为介导雷公藤红素保护作用的活性内源性化合物。研究发现，4-辛基衣康酸(4-OI)作为细胞渗透性衣康酸模拟剂，可通过激活孕烷X受体(PXR)和增强转录因子EB (TFEB)介导的自噬来减弱Con A诱导的肝损伤。雷公藤红素增加衣康酸和4-OI，促进TFEB介导的溶酶体自噬激活，以PXR依赖的方式缓解Con A诱导的肝损伤。结果表明，PXR和TFEB介导的溶酶体自噬途径可能为治疗自身免疫性肝炎提供有前景的治疗靶点。

研究亮点：

1. 雷公藤片(TWT)对Con A型急性肝炎有改善作用；

2. 雷公藤红素是TWT的主要活性成分之一，对Con A型肝炎有一定的缓解作用；

3. 雷公藤红素增加衣康酸，减少Con A诱导的肝损伤；

4. 激活PXR和增强TFEB为治疗自身免疫性肝炎（AIH）提供了潜在治疗靶点。

论文ID

原名：Tripterygium wilfordii protects against an animal model of autoimmune hepatitis

译名：雷公藤可预防自身免疫性肝炎

期刊：Journal of Ethnopharmacology

IF：5.195

发表时间：2023.03

通讯作者：李飞

通讯作者单位：中国科学院昆明植物研究所，四川大学华西医院

期刊简介

实验结果

1. 雷公藤片（TWT）改善con A诱导的急性肝炎

我们首先研究了TWT在体内Con A诱导的肝炎中是否具有保护作用。肝脏形态学分析表明，TWT部分恢复了Con A诱导的点状损伤（图S1A）。与Con A组相比，Con A-TWT-M（中剂量）组和Con A-TWT-H（高剂量）组的氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）和碱性磷酸酶（ALP）水平降低，而低剂量的TWT未能改善Con A诱导的肝损伤（图S1B–D）。类似地，与Con A组相比，Con A-TWT-M和Con A-TWT-H组的总胆汁酸（TBA）水平显著降低，但Con A-TWT-L组没有降低（图S1E）。这些数据共同表明TWT改善了Con A诱导的急性肝炎。

图1雷公藤红素改善Con A诱导的肝损伤

（A）脾脏指数。（B）血浆AST和ALT活性。（C）血浆中TBA的水平。（D）肝组织中CD4的H&E染色和免疫组化。（E）肝脏炎症相关基因的mRNA水平。（F）肝细胞凋亡相关基因的mRNA水平。（G）血浆IL6含量的ELISA分析。（H）肝脏中t-JNK和p-JNK表达的蛋白质印迹分析。*P<0.05。

2. 雷公藤红素改善con A诱导的急性肝炎

由于雷公藤红素是TWT的主要活性成分，因此我们在体内研究了雷公藤红素是否对Con A诱导的肝炎具有保护作用。显著增加的脾脏指数（脾脏重量/体重 × 100%）、血浆ALT、AST和TBA水平，证实模型被成功诱导；所有这些变化都通过雷公藤红素处理逆转（图1A–C）。肝脏的H&E染色在Con A诱导的肝炎模型中显示炎症、坏死和炎性细胞浸润的迹象，而这些特征在用Con A和雷公藤红素（cela）处理的动物中几乎不存在。Con A组的组织学评分高于Con A+ cela 组（图1D）。CD4染色显示，Con A诱导的CD4+T细胞增加在用雷公藤红素处理组中减少（图1D和图S2A）。与Con A组相比，Con A+Cela组中白细胞介素6（Il6）和趋化因子C–C基序配体2（Ccl2）的mRNA水平显著降低（图1E）。炎症相关基因（例如环氧化酶1（Cox1）和环氧化酶2（Cox2））在Con A组中显著增加，所有这些都在Con A+Cela组中被逆转（图1E）。Con A促进肝细胞凋亡诱导的肝损伤。此外，我们还测试了与凋亡相关的基因的表达，发现与Con A组相比，雷公藤红素改变了B细胞淋巴瘤-2（Bcl2）、p53、p21和转化生长因子-β（Tgfb）mRNA（图1F）。Con A增加了血浆中IL6的浓度，雷公藤红素恢复了IL6水平（图1G）。此外，蛋白质印迹的结果显示，Con A增加了p-JNK的水平，该水平通过雷公藤红素处理后回调（图1H）。这些数据共同表明，雷公藤红素通过上调炎症和凋亡途径的正常化改善了Con A诱导的急性肝炎。

图2雷公藤红素改善了血浆代谢紊乱

（A）负离子模式下的PCA评分图和血浆离子LC-MS数据导出的载荷图。（B）血浆中相关代谢产物的热图分析。（C）肝脏中胆汁酸相关基因的mRNA水平。（D）血浆和肝脏中衣康酸的水平。（E）肝脏中Irg1的mRNA水平。（F）雷公藤红素处理后肝脏中Irg1的mRNA水平。*P<0.05。

3.雷公藤红素可改善con A诱导急性肝炎的代谢紊乱

多变量分析显示，对照组、Con A处理组和Con A+Cela联合治疗组的血浆代谢组学分布在PCA模型的得分图上分离（通过正离子和负离子模式分析）（图2A和图S2B）。通过血浆中差异代谢产物的载荷散点图筛选，我们发现几种胆汁酸、肉碱和长链脂肪酸发生了改变（图2A和图S2B）。进一步的分析表明，Con A组中10种长链酰基肉碱、6种胆汁酸（BAs）和长链脂肪酸（FAs）的水平增加，经雷公藤红素处理后它们水平向正常组恢复（图2B）。与BA稳态维持相关的基因表达，包括固醇12α-羟化酶（Cyp8b1）、胆固醇7α-羟酶（Cyp7a1）、钠牛磺胆酸共转运多肽（Ntcp）、有机阴离子转运多肽1（Oatp1）和Oatp4、多药耐药蛋白4（Mrp4）和Mrp2以及胆盐输出泵（Bsep）水平，被Con A显著下调，并通过雷公藤红素处理部分恢复（图2C）。同样，与FA代谢相关的基因的mRNA水平，包括Pgc1a、Cd36和肉碱棕榈酰转移酶1（Cpt1），通过Con A降低，并通过雷公藤红素处理部分恢复（图S1C）。另一方面，与Con A组相比，雷公藤红素处理未改变参与从头FA生物合成（包括脂肪酸生物合成（Fasn）和长链脂肪酸延伸（Elovl6））基因的mRNA水平（图S1C）。Con A诱导的AIH伴随着保护性内源性代谢产物衣康酸的水平升高，肝脏中的雷公藤红素也上调了衣康酸（图2D）。免疫应答基因1（Irg1）的表达在Con A组中上调，其基因产物负责衣康酸的产生，并通过雷公藤红素处理恢复（图2E）。然而，我们还发现，雷公藤红素处理上调了Irg1的表达水平（图2F）。这些结果表明，雷公藤红素通过使参与这些代谢途径的基因产物表达正常化，逆转了Con A诱导的与BA和FA稳态相关的代谢紊乱。我们的结果还表明，雷公藤红素调节了Irg1的表达，并增加了细胞保护性内源性代谢产物衣康酸的水平，这可能与雷公藤红素改善肝损伤有关。

图3 4-OI通过上调PXR靶基因改善Con A诱导的肝损伤

（A）血浆AST、ALT和ALP活性。（B）血浆中TBA的水平。（C）肝脏H&E染色。（D）血浆中IFNγ含量的ELISA分析。（E）血浆IL-6含量的ELISA分析。（F）血浆TNFα含量的ELISA分析。（G）肝脏炎症相关基因的mRNA水平。（H）NRF2在肝脏中表达的靶基因。（I–J）肝脏中NRF2表达的蛋白质印迹分析（核裂解物）。（K）肝脏中PXR表达的靶基因。(L–N) 4-OI体外处理24 h后原代小鼠肝细胞PXR靶基因表达的定量聚合酶链式反应（QPCR）分析。（O）原代小鼠肝细胞中UGT1A1和CYP3A11表达的蛋白质印迹分析。*P < 0.05。

4. 4-OI激活Nrf2并减轻con A诱导的AIH炎症

衣康酸是一种三羧酸循环中间体，具有生物活性，包括抗炎、抗菌和抗病毒感染。为了确定衣康酸可否作为雷公藤红素缓解Con A诱导的AIH中的潜在介质，我们使用了可渗透细胞的衣康酸衍生物4-OI作为衣康酸模拟物。4-OI处理可使血浆ALT、AST、ALP和TBA水平显著降低（图3A–B）。病理检查显示，与Con A组中观察到的情况相反，Con A+4-OI组组织学形态正常，没有肝细胞损伤或炎性浸润的迹象（图3C）。4-OI处理也逆转了Con A导致的IFNγ、IL-6和TNFα的血浆水平升高（图3D–F）。与Con A组相比，ConA+4-OI组中Cox2、Ccl2、Il6和FBJ骨肉瘤癌基因（C-fos）的mRNA水平显著降低，而Il10和jun原癌基因（C-jun）的水平没有改变（图3G）。抗氧化酶的表达水平（包括核因子红细胞-2相关因子2（Nrf2）），以及Nrf2靶基因（包括NADPH醌氧化还原酶-1（Nqo-1）、血红素加氧酶-1（Ho-1）、谷氨酸-半胱氨酸连接酶修饰亚基（Gclm）和谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基（Gclc）），通过4-OI处理标准化（图3H）。免疫印迹的结果表明，4-OI可以激活来自新鲜肝脏样品的细胞核裂解物中的NRF2（图3I）。这些数据表明，4-OI通过激活NRF2信号通路保护Con A诱导的急性肝损伤。

图4在Pxr−/−小鼠中，4-OI对Con A诱导的肝损伤改善被消除

（A）Pxr−/−小鼠血浆ALT活性。（B）Pxr−/−小鼠血浆AST活性。（C）Pxr−/−小鼠血浆ALP活性。（D）Pxr−/−小鼠肝脏的H&E染色。（E）Pxr−/−小鼠血浆中IFNγ含量的ELISA分析。（F）Pxr−/−小鼠血浆中IL-6含量的ELISA分析。（G）Pxr−/−小鼠血浆中TNFα含量的ELISA分析。（H）Pxr−/−小鼠肝脏炎症相关基因的mRNA水平。（I）Pxr−/−小鼠肝脏中NRF2表达的靶基因。*P < 0.05。

5. 4-OI通过PXR对con A诱导的肝炎有保护作用

鉴于其他地方报道的证据表明，PXR的激活可能是保护Con A诱导的肝损伤的潜在机制，于是我们研究4-OI对Con A诱导的AIH的保护作用是否也涉及PXR活性改变。PXR靶基因UDP葡糖醛酸基转移酶1A1（ugt1a1）的mRNA水平在Con A组中显著降低，在Con A+4-OI组中升高（图第3J段）。为了找到4-OI和PXR激活之间关系的更直接证据，我们用4-OI处理原代小鼠肝细胞。用4-OI处理小鼠原代肝细胞增加了Ugta1、Oatp2和细胞色素P450 3A11（Cyp3a11）的mRNA和蛋白质水平（图3K-N）。这些结果表明，4-OI可以在体外激活PXR信号通路，并可能部分解释其在体内对Con A诱导的急性肝损伤的保护作用。

为了阐释PXR在4-OI对Con A诱导的急性肝炎的保护中的作用，我们采用Pxr−/−小鼠模型进行探究。PXR的敲除排除了4-OI对Con A诱导的急性肝炎的保护作用，因为与Con A组相比，我们在Pxr−/−小鼠中未观察到4-OI处理后WT小鼠AST、ALT和ALP水平的降低（图4A–C）。组织学评分显示，4-OI没有减轻P xr−/− 小鼠中Con A诱导的肝损伤（图4D）。在Pxr−/−小鼠中，4-OI并未改善Con A导致的血浆中IFNγ、IL-6和TNFα水平升高（图4E–G）。类似地，Con A诱导的Cox2、Ccl2、Il6、Il10、C-fos和C-jun的上调表达不能通过4-OI处理正常化（图4H）。与Con A组相比，在Pxr−/−小鼠中，4-OI处理没有显著改变Ho-1、Nqo-1、Gclm和Gclc的mRNA水平（图4I）。这些结果强调了4-OI对Con A诱导的急性肝炎的保护作用需要PXR。

图5 PXR的缺失会加重Con A诱导的肝损伤

（A）血浆ALT、AST、TBA和NO水平。（B）肝脏的H&E染色。（C）肝脏炎症基因mRNA表达的QPCR。*P < 0.05。

6. PXR的缺失加重了con A诱导的肝损伤

为了确定PXR在Con A诱导的肝损伤中的作用，我们用Con A处理WT和PXR−/−小鼠。四组的PCA分析表明，在负电离模式下，WT Con A和KO Con A组的血浆样品与对照组分离（图S2A）。Con A诱导的肝损伤在Pxr−/−小鼠中比WT小鼠更严重，因为用Con A处理的Pxr−/−小鼠的AST和ALT水平显示出更显著的升高（图5A）。同样，Con A处理的动物血浆TBA和一氧化氮（NO）增加，并且Pxr−/−小鼠的这种增加比WT小鼠更明显（图5A）。组织学分析显示，Con A组在WT小鼠中表现出坏死和炎性浸润实质性坏死，在Pxr−/−小鼠中更为严重（图5B）。血浆代谢组学用于确定WT Con A和KO Con A组之间的差异（图S3A）。与对照组相比，Con A组中增加幅度最高的前四个离子（m/z = 391.2854-、498.2895-、514.2843-和514.2843-），分别被鉴定为脱氧胆酸（DCA）、牛磺胆酸（TCDCA）和牛磺胆酸-α/β-盐酸（Tα/βMCA）。胆汁酸的靶向分析显示，几种胆汁酸（包括TCDCA、TCA和Tα/βMCA）和牛磺脱氧胆酸/牛磺熊去氧胆酸（THDCA/TUDCA）在WT Con A组中增加，在KO Con A中进一步增加（图S3B）。这些结果表明，PXR通过调节胆汁酸代谢在Con A诱导的肝炎中发挥重要作用。

与胆汁酸合成和转运相关的基因表达在WT Con A组中下调，在KO Con A中进一步减少（图S3C）。与WT Con组相比，WT Con A组的Il6、Ccl2、Il1b和C-fos的mRNA水平分别增加了20倍、98倍、4倍和3.7倍。与KO-Con组相比，KO-Con A组的mRNA水平升高了40倍、145倍、24倍和5.3倍（图5C）。这些结果表明，Con A诱导的肝损伤和炎症在Pxr−/−小鼠中更为严重。

图6 4-OI诱导原代肝细胞自噬流

（A）TFEB及其靶基因在野生型小鼠中的mRNA表达。（B）TFEB及其靶基因在原代小鼠肝细胞中的mRNA表达。（C）4-OI体外处理24小时后原代小鼠肝细胞中相关自噬基因的表达。（D）4-OI体外处理24小时后，通过免疫荧光法在原代小鼠肝细胞中促进TFEB从细胞质转移到细胞核。（E）在不同剂量的4-OI中TFEB的荧光强度。（F）TFEB及其靶基因在野生型小鼠和Pxr−/−小鼠原代小鼠肝细胞中的mRNA表达。（G）PCN体外处理24小时后，通过免疫荧光测定，PCN促进原代小鼠肝细胞中TFEB从细胞质易位至细胞核。*P< 0.05。

7. 4-OI诱导原代肝细胞自噬流

PXR的缺失导致微管相关蛋白轻链B（LC3B）–I、–II以及Beclin-1蛋白水平显著降低。4-OI联合处理上调了TFEB的几个靶基因，包括ATP酶、H+转运、溶酶体V1亚基H（Atp6v1h）、ATP酶、H+转运、溶酶V1亚基D（Atp6v1d）和V型质子ATP酶亚基e1（Atp6B0e）（图6A）。4-OI是否能激活TFEB介导的肝细胞自噬尚不清楚。为了研究4-OI促进小鼠原代肝细胞中TFEB介导自噬的潜在机制，我们首先确定了4-OI对体外TFEB靶基因表达的影响。在用4-OI处理的小鼠原代肝细胞中，Tfeb的mRNA水平没有改变。然而，小鼠原代肝细胞中的Atp6v1h和Atp6v1d的mRNA水平通过4-OI处理而增加（图6B）。用4-OI处理原代小鼠肝细胞也增加了sequestonsome1（Sqstm1）、溶酶体相关膜蛋白1（Lamp1）、微管相关蛋白1轻链3β（MapLC3b）和组织蛋白酶D（Ctsd）的表达，表明4-OI诱导了与自噬和溶酶体途径相关基因的表达（图6C）。此外，4-OI以剂量依赖的方式促进了TFEB在小鼠原代肝细胞核中的积累，这表明4-OI增加了TFEB从胞浆向细胞核的易位（图6D和E）。我们还测试了肝细胞中MapLC3B、LAMP1、CTSD和SQSTM1的荧光强度，并观察到LAMP1、CTCD和SQSTM2增加了4-OI（图S4）。为了证实4-OI是否影响线粒体自噬或溶酶体自噬，我们从肝细胞中分离线粒体和溶酶体蛋白进行蛋白质印迹分析。免疫印迹的结果表明，4-OI增加了溶酶体中Pro-CTSD、Mat-CTSD，Lamp1、SQSTM1和TFEB的表达，而4-OI或TFEB A1处理使得LC3I/LC3I降低（图S5A）。然而，线粒体中Pro-CTSD、LAMP1和SQSTM1的表达在4-OI处理后没有变化（图S5B）。总之，这些结果表明4-OI增加了TFEB介导的自噬和溶酶体自噬。为了证实TFEB介导的自噬是否依赖于PXR，我们检测了PXR是否可以在野生型小鼠（WT）和PXR−/−小鼠（KO）中调节TFEB。我们发现，与KO组相比，WT组的Tfeb、Pgc1a、Atp6v1h和Atp6v1d显著降低（图6F）。PCN促进了TFEB在细胞核中的积累（图6G）。这些结果表明，PXR激活对于TFEB从胞质溶胶转移到细胞核至关重要。总之，这些结果表明4-OI增加了TFEB介导的自噬和溶酶体自噬。

图7 Torin1还能改善Con A诱导的小鼠肝脏损伤

（A）血浆AST活性。（B）血浆ALT活性。（C）血浆中ALP活性。（D）肝脏的H&E染色。（E）肝脏炎症相关基因的mRNA水平。（F）血浆中IL-6含量的ELISA分析。（G）雷公藤红素抗肝损伤的保肝作用机制。*P < 0.05.。

8. Torin1还能改善con A诱导的小鼠肝损伤

最后，为了证明TFEB激活在Con A诱导的肝损伤中的潜在益处，本研究中使用了TFEB激动剂Torin1。与对照组相比，Con A组的AST、ALT、ALP和TBA水平显著升高，而Con A-Torin1组的水平降低（图7A–D）。病理分析显示，ConA-Torin1组的肝脏组织学正常（图7E）。Torin1降低了Con A诱导的Cox2、Ccl2和Il6 mRNA水平的增加以及Il6血浆浓度的升高（图7F–G）。我们的结果表明，其激动剂Torin 1激活TFEB足以改善Con A诱导的急性肝炎，这与4-OI处理观察到的结果相似。我们的结果突出表明TFEB是治疗急性肝炎的一个潜在靶点。

目前，AIH的治疗仅限于皮质类固醇、硫唑嘌呤和替代药物。因此，迫切需要开发新的治疗方法和新的候选药物。在本研究中，我们发现雷公藤红素显著减轻了Con A诱导的肝炎。在Con A诱导的肝损伤期间，衣康酸水平显著升高，4-OI处理也改善了Con A诱发的肝炎。4-OI剂量依赖性地激活PXR信号通路和TFEB介导的自噬，表明PXR激动剂和TFEB激动剂在治疗Con A诱导的肝损伤方面具有潜在的治疗价值（图7H）。

4-OI是衣康酸盐的衍生物，已被用于研究或探索衣康酸在体内外的生理功能。最近的报告表明，4-OI处理激活了核Nrf2并上调了其靶基因（Ho-1和Nqo1），以减少肝脏缺血再灌注（I/R）损伤。4-OI还通过激活Nrf2和抑制小鼠中的NF-κB来保护Con A诱导的肝损伤，这与我们的实验结果一致。在我们的研究中，我们证明4-OI还激活PXR，并上调其靶基因（Ugat1a1、Cyp3a11和Oatp2）在小鼠原代肝细胞中的表达。为了了解4-OI是否通过依赖于PXR的机制发挥其保护作用，WT（C57BL/6J）和PXR−/−小鼠接受4-OI或对照处理，然后经Con A处理诱导肝损伤。正如预期的那样，4-OI不能减轻Con A诱导的Pxr−/−小鼠的肝损伤。此外，4-OI还促进小鼠原代肝细胞中TFEB介导的自噬。这些发现为4-OI通过激活PXR和TFEB介导的自噬对Con A诱导肝损伤的保护作用提供了直接证据。

Nr1i2基因编码的核转录因子PXR调节外源性毒性物质的代谢和清除。PXR通过调节代谢酶和药物转运蛋白、炎症、氧化应激和细胞凋亡来调节肝脏稳态。PXR的激活先前已被证明可以预防出血性休克（HS）诱导的肝损伤、脂多糖（LPS）诱导的肝脏损伤、香烟烟雾诱导的肺损伤和石胆酸（LCA）诱导的胆汁淤积。先前的报道表明，PXR可以通过激活yes相关蛋白（YAP）信号通路来增大肝脏并改变活细胞命运。利福平，一种人类PXR激动剂，被认为对治疗炎症性肠病有改善作用。利福平可以通过抑制LPS诱导的炎症中细胞表面IL-1β的作用来减少IL-6和TNFα的产生。PXR不仅在肝细胞中表达，而且在肝的星状细胞和库普弗细胞中也表达。慢性PXR激活诱导原代肝细胞培养中促炎细胞因子表达的微弱上调，但显著阻断许多促炎NFκB靶基因的产生。此外，PCN先前已被证明通过抑制PXR中独立的炎症因子的表达来减轻Con A诱导的急性肝损伤。在本研究中，我们发现PCN促进TFEB在细胞核中的积累。

自噬在各种应激条件下维持细胞稳态方面发挥着重要作用。例如，内皮细胞自噬的激活可以通过减少氧化应激来保护CCl4诱导的肝纤维化。脂联素处理还显示，增加AMP活化蛋白激酶（AMPK）和Unc-51样自噬活化激酶1/2（ULK1/2）介导的自噬，可以预防对乙酰氨基酚（APAP）诱导的小鼠肝损伤。TFEB是参与溶酶体生物发生和自噬相关基因转录的关键转录因子。在Gao-binge诱导的急性肝损伤模型中，由于mTORC1的激活导致小鼠肝脏自噬不足，TFEB介导的溶酶体生物发生受损。Torin1处理增加了小鼠肝脏中TFEB的水平，这减少了乙醇引起的肝损伤。然而，在相关研究中，TFEB调节Con A诱导的肝损伤的因果作用和机制尚未被研究。在本研究中，我们为TFEB在AIH中的失调提供了令人信服的证据，并且靶向TFEB介导的自噬可能为AIH的治疗提供额外的治疗益处。我们需要进一步的研究来证实TFEB和PXR之间的关系，特别是发现PXR基因敲除的小鼠与WT小鼠相比，天生表现出迟缓的自噬流。

本研究的一些局限性需要解释和证明。在本研究中，动物在Con A诱导前用保护剂进行预处理，而不是进行后处理。我们的实验设计参考了一些已发表的文献，这些文献也研究了候选药物对Con A诱导的肝损伤的保护作用。因此，本研究中报告的缓解AIH的候选靶点无法立即转化，需要通过干预型研究设计进行进一步研究。尽管如此，这些研究，包括我们的研究，确实增加了宝贵的知识，扩大了Con A诱导的自身免疫性肝炎动物模型的潜在药物治疗靶点。重要的是，我们的发现也为TFEB介导的自噬在减轻自身免疫性肝炎动物模型中的作用提供了新的线索，迄今为止从未有研究者报道。其次，我们决定在本研究中使用血浆样本进行代谢组学分析，这可能无法完全捕捉血液代谢组。血浆和血清在代谢组学研究中都有广泛的应用，但使用血浆还是血清仍然存在争议。血清样品容易受到凝血时间和温度的影响，这可能会影响代谢物的稳定性。同时，我们使用装有抗凝剂的试管采集血浆样本，其重复性优于血清样本。通过对慢性胰腺炎患者样本进行血浆和血清代谢组学分析，我们检测到620种血浆样本代谢产物和616种代谢产物，其中检测到的代谢产物在两个样本中的相似性非常高。因此，本研究选择了血浆样本。

结论

总之，在Con A诱导的急性肝炎动物模型中，我们发现TWT预处理可以减轻肝炎和肝损伤，目前的研究揭示了雷公藤红素在该模型中的保护作用，并且雷公藤红素增加了肝脏中衣康酸盐的水平。我们的研究还表明，4-OI（补充衣康酸盐）通过激活PXR和TFEB介导的自噬来减少Con A诱导的肝损伤。使用Pxr−/−小鼠和自噬激活剂干预等方法，本研究结果揭示4-OI可通过调节TFEB-Pxr信号通路，在保护Con A诱导的肝损伤方面具有良好的效果。因此，靶向TFEB介导的溶酶体生物发生可能是预防和治疗AIH的潜在靶点。

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36907478/

【福利时刻】购买细胞及相关实验，扫码或加微信（1278317307）入群。

本公众号已与浙江慧通测评动物实验中心搭建紧密的合作关系：该动物中心已获得动物使用许可，如您需要含药血清制备-成分分析、灌胃给药、造模、药理、毒理以及相关实验（sci）外包服务，欢迎联系我们！

【福利时刻】毕业季找工作点击链接，多家企业30W+年薪工作招聘任你选（赶紧点击进入注册，上传简历吧~ ） 。