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731部队名义上是防治疾病与净化饮水，实际上就是拿人的活体做生化实验，中国人、朝鲜人和联军战俘都深受其害。由于细菌在营养丰富的受体内会大量快速繁殖，所以日军在前期会给实验对象吃各种长胖的食物，一旦日军发现实验对象长胖了，就会被拖去做实验。
试验方法各种各样，说成百上千都不为过。比如为了测试人的冻伤程度，日军将试验者的手脚在不同时间段进行冷冻，然后再插入温水或者开水中解冻，以此来达到其实验效果，还会将被试验者身上的器官摘除以及将其手和脚进行互换，想想都觉得恐怖，不要以为这样就算结束了，731部队还有三大恐怖酷刑。
第一个是粪便刑，就是将不听话的俘虏或者劳工用铁丝绑起四肢扔进粪池里，然后日军就在其头顶任意大小便，这种粪便刑往往会对一个人摧残数天，就算不死，也会精神失常。
第二个酷刑是箱床刑，就是将人固定在床上，将头套在一个木箱里再往里面灌水，当水漫过鼻子时人就会猛烈地呛水，这种感觉小编想想就不寒而栗，相信很多人平时不小心被水呛到的时候，那感觉相当难受吧。最后一个就是穿钉靴，就是强制俘虏穿上带铁钉的长靴劳作，一会下来鲜血直流。
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