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躯体感觉由背根神经节神经元介导，其分子调控网络仍不完整，出生后基因筛查工具也有限。近日，清华大学肖百龙团队在《Nature Neuroscience》完成题为《Behavioral genomics identifies Credl1 as a cross-modal regulator of somatosensation》的研究，他们建立AAV9递送sgRNA的出生后DRG神经元CRISPR-Cas9敲除平台，并对20个候选基因开展行为基因组筛选，发现Credl1是触觉、温度、疼痛和瘙痒的跨模态调控因子。
研究团队用AAV9在新生Cas9小鼠脑室注射sgRNA，感染覆盖TUBB3、IB4、CGRP和NFH标记的DRG神经元亚群，并且对Trpv1、Piezo2和Scn9a的敲除效率做了mRNA、蛋白和功能验证。sgTrpv1小鼠的辣椒素响应神经元比例下降，sgPiezo2小鼠的快速适应机械电流和轻触反应明显减弱，sgScn9a小鼠的TTX敏感钠电流、动作电位发放和机械热冷及痒行为出现广泛缺陷。这些结果确认了出生后敲除平台能够绕开胚胎致死和发育补偿，并在成年小鼠中复现经典感觉表型。
20个候选基因的行为筛选里，sgCredl1组在0.6克Von Frey、针戳、刷、热板和冷板测试中均出现明显缺陷，并且CFA炎症痛模型中的机械痛敏也消失。Avil-creERT2介导的成年DRG特异性Credl1敲除小鼠重复了这些表型，其触觉、机械痛、热冷痛和组胺依赖及非依赖痒反应都下降，而体重、转棒和旷场运动没有明显异常。Credl1在DRG多种分子亚群中广泛表达，sgCredl1使mRNA下降约57.8%、蛋白下降约77.1%，cKO使mRNA下降约90.8%、蛋白下降约81.7%。
生化实验显示CREDL1与Nav1.1、Nav1.3、Nav1.6、Nav1.7、Nav1.8和Nav1.9互作，并且与Nav1.7在DRG神经元中共定位，敲除Credl1使Nav电流密度下降约89%、动作电位发放减少和基强度升高。过表达CREDL1使DRG神经元Nav电流密度增加约35.4%，并使电压依赖激活发生约15.1毫伏的左移，C端跨膜域缺失突变体失去结合和增强作用。人CREDL1的isoform2能够调控Nav1.7，isoform1则不能，C端跨膜域的序列差异决定了这种isoform依赖的调控。
Credl1敲除和过表达分别降低和增强感觉反应，其表型覆盖轻触、机械痛、热冷痛、炎症痛和痒，与Nav1.7缺陷的广谱感觉障碍相似。研究团队把出生后CRISPR筛选和躯体感觉行为学结合起来，为DRG表达基因的功能鉴定提供了可扩展平台，并且把CREDL1定位为Nav通道的辅助调控因子。CREDL1与Nav的相互作用界面可能为镇痛药物设计提供新靶点，针对DRG亚群的sgCredl1递送也为疼痛和瘙痒的基因治疗提供了思路。
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