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ATA-304C功率放大器在单细胞电穿孔实验中的应用

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【概述】

中国科学技术大学研究团队使用ATA-304C功率放大器,搭建细胞实验系统。

实验名称:ATA-304C功率放大器在单细胞电穿孔实验中的应用

实验内容:单细胞电穿孔是在传统批量电穿孔技术基础上发展起来的一种高精度单细胞操作技术,现广泛应用于神经生物学和发育生物学的研究中。该技术利用短暂的高压电脉冲在目标细胞膜上施加足够强的电场,瞬时破坏细胞膜磷脂双分子层的静电结构,从而在膜上形成可逆的纳米级小孔。这些小孔允许DNA、RNA、蛋白质、染料、药物等原本不能自由穿透细胞膜的大分子或带电分子进入细胞内部。电脉冲结束后,细胞膜上的小孔会在几十到几百毫秒内自行修复,将导入的物质“封锁”在细胞内,实现对单个细胞的精确操控。

研究方向:神经生物学

测试设备:ATA-304C功率放大器、玻璃电极、显微镜、电脑等。

实验过程:



图1:实验系统实物图

首先,将特制的硼硅酸盐玻璃毛细管拉制成尖端极细(0.5-1μm)的微电极,尖端灌入无内毒素的质粒溶液,在显微镜下用微操机械臂将微电极尖端缓慢移动至待穿孔的细胞附近,之后通过ATA-304C功率放大器将特定波长和频率的正弦波电压放大十倍,诱导细胞膜瞬时穿孔,从而将玻璃电极中的外源性DNA导入细胞中进行基因表达操纵。电穿孔后12小时,在荧光显微镜下筛选出表达阳性的细胞。

实验结果:



图2:实验结果

在显微镜下将特制的玻璃电极通过微操机械臂移动至受精后4天的斑马鱼幼鱼的运动神经元胞体旁。随后,利用ATA-304C功率放大器将特定波长和频率的正弦波电压放大十倍后成功诱导细胞膜瞬时穿孔,从而将玻璃电极中的质粒递送入细胞中进行基因表达操纵。电穿孔后12小时,在荧光显微镜下检验基因表达操纵是否成功,成功进行操纵的神经元表达红色荧光。

【推荐产品】:ATA-304C功率放大器



图:ATA-304C功率放大器指标参数

本文实验素材由西安安泰电子整理发布。Aigtek已经成为在业界拥有广泛产品线,且具有相当规模的仪器设备供应商,样机都支持免费试用。西安安泰电子是专业从事功率放大器、高压放大器、功率信号源、前置微小信号放大器、高精度电压源、高精度电流源等电子测试仪器研发、生产和销售的高科技企业。

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