中国医科大学研究人员在喉癌中STAT1通过APOL6促进肿瘤相关巨噬细胞脂质沉积的研究中,使用BIOG中大量高纯质粒提取试剂盒成功提取出菌液中的过表达质粒!
大肠杆菌质粒提取核心难点在于菌体裂解程度难以把控,裂解不足会降低质粒得率,裂解过度易造成基因组DNA污染。菌体内源RNA含量高,RNase消化不充分易干扰浓度检测与下游酶反应;革兰氏阴性菌特有的内毒素、菌体蛋白易伴随质粒共析出,内毒素会严重抑制细胞转染。菌株、载体与培养条件也会影响质粒拷贝数,菌体老化可引发质粒丢失。操作剧烈易破坏超螺旋质粒构型,盐离子等杂质残留,也会干扰后续分子实验。
中国医科大学研究者在尝试过多款不同品牌的质粒提取试剂盒后,最终使用BIOG中大量高纯质粒提取试剂盒成功提取出了大肠杆菌中的STAT1过表达质粒,并成功进行了后续的细胞转染!
相关文献:喉癌中STAT1通过APOL6促进肿瘤相关巨噬细胞脂质沉积的研究
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