人白介素27(IL-27)ELISA Kit
供应商:深圳市恒昊生物科技有限公司
人白介素27(IL-27)是IL-12细胞因子家族的关键成员,是一种具有双向免疫调节功能的异二聚体蛋白,以下从结构、来源、功能、临床应用四个维度详细说明:
1. 分子结构与合成来源
IL-27由两个独立的亚基通过共价结合形成:分别是分子量28kDa的p28亚基(属于IL-6类细胞因子亚家族),和分子量39kDa的EBI3亚基(EB病毒诱导基因3编码,与IL-12的p40亚基同源)。两个亚基必须同时结合才能形成具有生物学活性的完整IL-27分子,单独的亚基无免疫调节功能。
它主要由活化的抗原呈递细胞合成和分泌,包括树突状细胞、巨噬细胞、单核细胞,在病原体相关分子模式(如细菌脂多糖)、促炎因子刺激下会大量释放。
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IL-27 ELISA Kit检测原理
IL-27 ELISA Kit采用的是双抗体夹心法的检测原理,具体过程可以分为以下几个步骤:
- 预包被抗体:试剂盒的96孔板已经预先包被了特异性抗人IL-27的单克隆或多克隆抗体,这些抗体可以特异性结合样本中的IL-27抗原。
- 抗原抗体结合:向孔板中加入处理好的标准品和待测样本后,样本中的IL-27会与孔壁上预包被的抗体结合,洗去未结合的杂质和其他蛋白后,孔板上只留下结合的IL-27抗原。
- 检测抗体结合:随后加入生物素标记的抗IL-27检测抗体,该抗体会与结合在预包被抗体上的IL-27结合,形成“固相抗体-抗原-生物素化检测抗体”的复合物,洗涤去除未结合的游离检测抗体。
- 酶结合物反应:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素,亲和素能够与生物素特异性结合,因此HRP会被连接到复合物上,再次洗涤去除未结合的酶标亲和素。
- 显色与定量:加入底物TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺),HRP会催化TMB转化为蓝色产物,在酸性终止液(通常为硫酸)作用下转为黄色。产物的颜色深浅与样本中IL-27的浓度呈正相关——IL-27浓度越高,颜色越深,在450nm波长下检测的吸光度(OD值)也就越高。
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