AbMole 抑制剂篇丨 AZD5305（Saruparib）：高选择性 PARP1 抑制剂与 DNA 捕获剂，在合成致死与 DNA 损伤应答研究中的应用

摘要：AZD5305（Saruparib，AbMole，M10298，CAS No.：2589531-76-8）是新一代高选择性聚ADP核糖聚合酶 1（PARP1）抑制剂与PARP1-DNA捕获剂。PARP1 是单链断裂修复与复制叉稳定的核心分子，其催化活性的抑制与DNA捕获可诱发同源重组修复缺陷（HRD）细胞的合成致死。与同时抑制 PARP1/2 的第一代抑制剂不同，AZD5305 以近四百倍的选择性精准靶向 PARP1，在保持强效抗肿瘤活性的同时显著降低对造血系统的影响，是 DNA 损伤应答、复制应激与合成致死机制研究的核心工具化合物。本文梳理其分子机制、体内外研究表型与标准化实验方案。

一、AZD5305的分子作用机制
AZD5305（Saruparib，AbMole，M10298）对 PARP1 的 IC50 约 3 nM，对 PARP2 的 IC50 约 1.4 μM，选择性超过 400 倍，对 PARP 家族其他成员及数百种激酶几乎无活性。AZD5305拥有双重作用模式：一方面AZD5305能抑制 PARP1 的多聚 ADP 核糖基化活性，阻断单链损伤修复；另一方面，AZD5305 可强效将 PARP1 固定在 DNA 损伤位点，形成PARP1-DNA 滞留复合物，阻碍 DNA 复制叉前进，造成复制叉停滞、坍塌，最终引发染色体断裂。在 BRCA1/2、PALB2 等 HRD 背景细胞中，这种复制压力超过修复代偿阈值，触发合成致死；而野生型细胞拥有功能完整的同源重组修复通路，能够修复上述 DNA 损伤，因此可耐受AZD5305（Saruparib，AbMole，M10298）造成的损伤（野生型细胞可以启动同源重组修复，完成对染色体DNA的修补）。由于 PARP2 在红细胞生成中具有不可替代的功能，而AZD5305对PARP2 活性影响恰好较小，这使得AZD5305对造血祖细胞影响更小，动物体内外周血细胞参数恢复更快，这使得其在动物实验中具有较好的生物相容性。

二、AZD5305在细胞层面研究中的应用
在DLD-1 BRCA2-/- 细胞中（BRCA2 纯合敲除细胞中），AZD5305（Saruparib）处理细胞72 h后检测细胞活力，结果表明其IC50 低至纳摩尔级，并且100 nM 处理能抑制 90% 以上的细胞增殖，γH2AX 信号升高约 5 倍，G2/M 期细胞比例由 15% 升至 55%；而AZD5305对野生型细胞的 IC50 超过 10 μM。在 CCNE1 扩增、ATM 缺失等复制应激背景的细胞模型中，AZD5305 同样显示选择性杀伤，可用于探索复制应激依赖性的合成致死网络。联合策略方面，其与铂类、ATR 抑制剂（如Ceralasertib）联用在多种模型中产生协同效应，并可逆转部分获得性耐药，为 DNA 损伤应答通路研究提供了组合干预方案。对 AZD5305（Saruparib，AbMole，M10298）的机制验证实验中常用的检测指标包括：PARylation 水平、γH2AX 与 pRPA（S4/S8）标记的复制应激、微核率及 RAD51 foci 反映的同源重组功能状态。其中PARylation 水平能用来直接评价AZD5305（Saruparib，AbMole，M10298）对 PARP1 催化活性的抑制效果；γH2AX 标记 DNA 双链断裂，pRPA (S4/S8) 则能反映复制叉损伤与复制应激；微核率表征染色体断裂与基因组不稳定程度；RAD51 foci 用于评估细胞同源重组修复能力，判断细胞是否存在 HRD 特征。

三、AZD5305在动物实验研究中的应用
在动物层面，AZD5305（Saruparib）在 BRCA1/2 与 PALB2 突变的 PDX 小鼠模型中按 0.03~0.3 mg/kg 每日口服给药，能诱导持续的肿瘤消退，效果要优于等摩尔剂量的第一代 PARP 抑制剂，且长期给药期间红细胞与血小板参数保持稳定，凸显其血液学耐受性优势。还有研究在 BRCA1/2 相关卵巢癌 PDX 小鼠模型中进一步证实，AZD5305 单药即能产生持久的抗肿瘤活性；并且与卡铂（Carboplatin）联用显著延缓肿瘤进展并抑制内脏转移。这些体内数据与细胞层面的合成致死机制闭环吻合，为 DNA 损伤应答研究提供了高置信度的模型体系。

四、AZD5305相关细胞实验（文献参考举例）
该方案适配 PARP1 选择性抑制后的增殖、周期与 DNA 损伤标志物检测。
细胞系：DLD-1 BRCA2-/- 与 DLD-1 野生型结肠癌细胞系（或 Capan-1 胰腺癌细胞）
检测指标与方法：CellTiter-Glo 发光法检测细胞活力；Western blot 检测 γH2AX、cleaved PARP、pRPA（S4/S8）；PI 染色流式分析细胞周期；免疫荧光定量 RAD51 foci 与微核率。
给药浓度：0.1、1、10、100 nM（增殖检测）；1 μM（信号通路检测）
处理时长：增殖检测 72 h；周期、蛋白与免疫荧光检测 24 h
参考文献：Johannes J W, et al. Discovery of 5-{4-[(7-ethyl-6-oxo-5,6-dihydro-1,5-naphthyridin-3-yl)methyl]piperazin-1-yl}-N-methylpyridine-2-carboxamide (AZD5305): a PARP1-DNA trapper with high selectivity for PARP1 over PARP2 and other PARPs. Journal of Medicinal Chemistry, 2021, 64(19): 14498-14512.
*注：上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献调整。

五、AZD5305相关动物实验（文献参考举例）
该方案适用于 HRD 背景肿瘤的生长调控与联合干预研究。
动物模型：BRCA1/2 或 PALB2 突变 PDX/细胞系异种移植瘤小鼠模型
给药配制：0.5% 羧甲基纤维素钠悬液，口服给药
给药剂量：0.03~0.3 mg/kg，每日 1 次口服
给药方案：待肿瘤体积约 150~200 mm³ 启动给药，每周 2 次测量肿瘤体积与体重；对照组肿瘤达到终点体积时处死，取瘤组织检测 pRPA、γH2AX 及 RAD51 foci 等药效标志物；可设卡铂或 ATR 抑制剂联合组。
参考文献：Illuzzi G, et al. Preclinical characterization of AZD5305, a next-generation, highly selective PARP1 inhibitor and trapper. Clinical Cancer Research, 2022, 28(21): 4724-4736.
*注：上述方法来自公开文献，仅供相同目的实验参考。如实验目的、材料、方法不同，请参考其他文献调整。

六、AZD5305实验操作关键注意事项
1. AZD5305 工作液建议现配现用，长时间放置易造成活性下降；
2. 口服悬液配制需充分研磨分散，出现沉淀可短时超声助溶。

总结
综上，AZD5305（AbMole，M10298）以纳摩尔级活性、近四百倍的 PARP1 选择性与强效 DNA 捕获能力，精准靶向 HRD 细胞的复制脆弱性，是合成致死机制、DNA 损伤应答与复制应激研究的重要工具。其优异的选择性与体内耐受性，也为联合方案与耐药机制研究提供了理想平台。
*本文所述均为科研试剂，仅供科学研究参考

参考文献
[1] Johannes J W, et al. Discovery of AZD5305: a PARP1-DNA trapper with high selectivity for PARP1 over PARP2 and other PARPs. Journal of Medicinal Chemistry, 2021, 64(19): 14498-14512.
[2] Illuzzi G, et al. Preclinical characterization of AZD5305, a next-generation, highly selective PARP1 inhibitor and trapper. Clinical Cancer Research, 2022, 28(21): 4724-4736.
[3] Herencia-Ropero A, et al. The PARP1 selective inhibitor saruparib (AZD5305) elicits potent and durable antitumor activity in patient-derived BRCA1/2-associated cancer models. Genome Medicine, 2024, 16: 107.
[4] Dellavedova G, et al. The PARP1 inhibitor AZD5305 impairs ovarian adenocarcinoma progression and visceral metastases in patient-derived xenografts alone and in combination with carboplatin. Cancer Research Communications, 2023, 3(3): 489-500.
[5] Murai J, et al. Trapping of PARP1 and PARP2 by clinical PARP inhibitors. Cancer Research, 2012, 72(21): 5588-5599.
[6] Farres J, et al. PARP-2 sustains erythropoiesis in mice by limiting replicative stress in erythroid progenitors. Cell Death & Differentiation, 2015, 22(7): 1144-1157.