AbMole 抗生素篇丨 Olorofim（F901318）：真菌 DHODH 抑制剂，在病原真菌生物学及耐药机制研究中的应用

Olorofim（CAS No.：1928707-56-5，F901318，AbMole，M31108）是靶向真菌二氢乳清酸脱氢酶（DHODH）的选择性小分子抑制剂，也是Orotomide类抗真菌工具的代表分子。DHODH 是嘧啶从头合成通路的限速酶，催化二氢乳清酸氧化生成乳清酸，该反应是尿嘧啶、胞嘧啶等嘧啶核苷酸生物合成的必需步骤。真菌 DHODH 与人源同源蛋白的氨基酸序列差异较大，Olorofim 对真菌 DHODH 的选择性超过人源酶 2000 倍，因此特别适合病原真菌代谢与耐药机制的探究。
不同于唑类、棘白菌素类经典抗真菌工具分别靶向麦角固醇合成与细胞壁 β-葡聚糖合成，Olorofim（F901318，AbMole，M31108）作用于核苷酸代谢通路。当 DHODH 被抑制，真菌胞内嘧啶核苷酸库发生耗竭，直接干扰真菌 DNA 复制与 RNA 转录，进而抑制孢子萌发与菌丝延伸。同源建模与定点突变研究显示，Olorofim 结合于真菌 DHODH 的泛醌结合通道附近，通道关键残基突变可使真菌对其敏感性大幅下降，证实分子作用依赖真菌 DHODH 靶点。该分子对念珠菌、隐球菌等酵母样真菌无活性，活性谱集中于曲霉、赛多孢、暗色真菌等丝状真菌。
Olorofim（F901318，AbMole，M31108）的体外抗真菌活性已在多种致病真菌体系中得到系统表征。采用 EUCAST 微量肉汤稀释法测定，Olorofim 对烟曲霉（Aspergillus fumigatus）的 MIC 多处于 0.03-0.25 μg/mL 区间，对携带 TR34/L98H 唑类耐药突变的烟曲霉菌株活性保持不变；对多育赛多孢、暗色真菌等罕见丝状真菌同样具有纳克级抑制活性。时间－杀菌曲线显示该分子以抑制生长为主，可完全阻断分生孢子萌发与菌丝结构形成。构建 DHODH 酶活性位点突变的曲霉菌株后，突变株对 Olorofim 的敏感性显著下降，从遗传学层面证实了其靶点特异性。
Olorofim（F901318，AbMole，M31108）常被用于侵袭性真菌感染小动物模型的研究。例如在免疫抑制小鼠肺部曲霉感染模型中，通过环磷酰胺预处理造成小鼠中性粒细胞减少，气管接种烟曲霉分生孢子构建肺部侵袭性感染后，Olorofim 干预可显著提高小鼠存活率并降低肺组织真菌载量。在球孢子菌中枢神经系统感染小鼠模型中，Olorofim 干预同样可降低脑组织真菌负荷并延长生存时间。除曲霉与球孢子菌模型外，该分子也可应用于暗色真菌、镰刀菌感染模型，用于评估 DHODH 抑制对不同病原真菌体内定植与播散能力的影响。
综上，Olorofim（CAS No.：1928707-56-5，F901318，AbMole，M31108）作用于真菌嘧啶从头合成这一非传统靶点，不受唑类常见耐药突变的干扰。作为抑制真菌 DHODH的有力工具，Olorofim既可以用来解析嘧啶代谢如何调控真菌孢子萌发、菌丝形态发生，也能够用于评估自身对耐药病原真菌的杀伤能力，为真菌代谢生物学、新型抗真菌抗生素的研发提供了重要的分子工具。
* 本文所述均为科研试剂，仅供科学研究参考

参考文献
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