北京
图1：一张重建图像，显示了同时成像的多种染料的定位。该装置涉及两个sCMOS相机(包括Prime BSI)，以提供比率并形成多色定位图像。
背景
伊恩·多比博士和王静宇博士都在牛津大学从事先进光学和成像系统的研究工作。他们的其中一个项目旨在多色单分子定位显微镜(SMLM)中实现尽可能高的3D成像分辨率。这涉及使用4π-SMS显微镜，该显微镜将4幅干涉图像投射到相机上。
为了同时可视化2或3种染料，并收集通过传统荧光成像路径的二向色镜透射光，该成像系统还收集了二向色镜反射到荧光成像路径之外的光，即所谓的“回收荧光”。传统荧光与回收荧光强度的比值可用于区分发射波长接近的两种或三种染料，从而实现单激发激光的同步多通道3D SMLM。
由于多通道数据是在单个相机上同时采集的，通道间不存在漂移，且由于发射波长非常接近，色差也降到了最低。这意味着分子位置之间的空间关系是可靠的，其精度可达并低于约20纳米(各向同性)的三维分辨率。
挑战
在单分子应用中，最大化信号收集至关重要。在该系统中，照明激光波长被多个堆叠的发射滤光片阻挡。这种挽救的荧光信号仅为传统荧光信号的一小部分，因此灵敏度和高信噪比在此应用中至关重要。此外，对于需要大量图像帧来定位大量单分子的庞大3D体积，在保持灵敏度和信噪比的同时，高帧率也十分重要。
我们发现Prime BSI是一款出色的相机，并且在Photometrics的支持下，我们能够顺利地将这款顶尖相机应用于最前沿的超分辨率光学显微镜中。——Ian Dobbie博士，王静宇博士
解决方案
高速度、低读出噪声和高量子效率使Prime BSI成为该应用的理想解决方案。Dobbie博士对Prime BSI非常满意：“在这一极具挑战性的成像应用中，我们发现Prime BSI是一款出色的相机。Photometrics为我们提供了极佳的支持，协助我们将这款尖端相机应用于最前沿的超分辨率光学显微镜中。”
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