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核酸PCR实验室是开展基因扩增检测的专业场所,其净化工程建设须严格遵循《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》及相关生物安全规范。PCR实验室的建设和管理已纳入法制化、规范化的轨道。
一、功能分区与布局。PCR实验室原则上应划分为试剂准备区、样品制备区、扩增区和扩增产物分析区四个独立的工作区域。当采用实时荧光定量PCR仪时,扩增区和产物分析区可合并为一区。各工作区域应设置缓冲间,工作区与缓冲间宜安装连锁装置。不同功能的工作区必须分隔独立并设置明显标志,各工作区顶部应安装波长为254nm的紫外灯。
二、压力梯度控制。PCR实验室通过精确的压力梯度控制实现气溶胶污染的有效防控。试剂准备区相对于邻近区域保持正压(一般为+10Pa),以避免外部气溶胶污染进入。样品制备区同样维持正压(一般为+10Pa)。扩增区须保持负压(一般为-25Pa),防止气溶胶从本区向外泄漏。扩增产物分析区也须保持负压(一般为-25Pa)。各区域之间应维持稳定的10至15Pa压差梯度。
三、装修材料与通风系统。PCR实验室的围护结构应牢固且气密性良好。墙体内壁应光洁、不积尘、耐腐蚀、易清洗消毒。地面宜使用PVC卷材或环氧树脂自流平,材料须满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。实验室宜采用全送全排的气流组织形式,严格控制送排风比例以保证各实验区的压力要求。新风经热湿处理及三级过滤后送入室内。
核酸PCR实验室净化工程的建设须从功能分区、压力梯度控制到装修材料选型进行系统规划,确保实验室满足基因扩增检测的专业要求。
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