Cell Rep Med丨老药新用——袁松涛/刘庆淮团队发现EGFR抑制剂可将RPE悬液移植的“劣势”转化为“优势”

视网膜色素上皮（ RPE ）细胞移植被视为治疗年龄相关性黄斑变性（ AMD ）、视网膜色素变性等退行性眼病的前沿策略。全球多项临床试验已初步证实其可行性。然而，一个长期困扰领域的问题始终未能解决：移植后的 RPE 细胞为何难以与宿主视网膜实现功能性整合？

近日，南京医科大学第一附属医院袁松涛、刘庆淮团队联合香港大学范国平、南京医科大学季旻珺等合作者在Cell ReportsMedicine上发表了题为EGFR inhibition promotes functional engraftment and graft survival via donor-derived CHI3L1 in fetal RPE suspension transplantation的研究论文。研究团队通过单细胞转录组测序、空间转录组学及多种体内外模型，揭示EGFR是阻碍悬液供体RPE细胞功能性整合的关键分子屏障，而FDA已批准的EGFR抑制剂厄洛替尼（ erlotinib ）能够有效破解这一难题，将RPE悬液移植从“劣势”转化为“优势”。

单细胞测序锁定“元凶”： EGFR 是供体 RPE 功能障碍的标志物

RPE 移植有悬液注射和细胞片移植两种主要方式。悬液注射操作简便、创伤小，但供体细胞容易形成无极性、多层堆叠的细胞团块；细胞片移植虽能维持细胞极性，却常伴随出血、纤维化等手术并发症。无论哪种方式，供体细胞与宿主 RPE 层的功能性整合都是决定疗效持久性的关键。

为探寻整合失败的分子机制，研究团队采用近红外纳米探针标记供体 RPE 细胞，移植后 1 天通过流式分选获取供体细胞，进行单细胞 RNA 测序。结果令人意外：供体 RPE 细胞中上调最显著的受体酪氨酸激酶（ RTK ）竟然是 EGFR ，而宿主 RPE 在生理或 退行条件下几乎不表达 EGFR 。免疫荧光进一步证实， EGFR 特异性表达于聚集在宿主 RPE 层上方的供体细胞团块中。这意味着——移植过程本身可能诱导了供体 RPE 细胞的“应激状态”，而 EGFR 正是这一状态的核心驱动者。

EGFR 抑制：让供体细胞“归队”

既然 EGFR 是“元凶”，那么抑制它会怎样？研究团队从两个层面进行了验证：一是构建 EGFR 基因敲低（ EGFR-KD ）的供体 RPE 细胞，二是使用 厄洛替尼 进行药理学抑制。结果高度一致—— EGFR 抑制显著促进了供体细胞融入宿主 RPE 层，形成 ZO-1 阳性的紧密连接，恢复上皮 样单层结构。

更令人振奋的是功能层面的恢复。 EGFR 抑制后，整合的供体细胞 高表达 成熟 RPE 标志物 RPE65 和 BEST1 ，纤维化标志物 FN1 显著降低；供体细胞与感光细胞外节标志物 rhodopsin 的共定位增加，提示供体细胞恢复了吞噬感光细胞外节的功能。荧光血管造影证实， EGFR 抑制组的外血 - 视网膜屏障（ oBRB ）明显修复，视动反应测试显示小鼠的视觉行为显著改善。

CHI3L1-IL13RA2 信号轴：决定供体细胞命运的 早期 “分子开关”

EGFR 抑制如何重编程供体 RPE ？单细胞轨迹分析揭示了一个关键分子—— CH I3L1 。在 EGFR 抑制组，供体细胞被导向一条 CHI3L1 高表达 的修复性分化路径，而 EGFR 表达逐渐下降。

机制上， EGFR 抑制通过 Wnt / β -catenin 信号通路诱导 CHI3L1 表达。 CHI3L1 随后发挥双重作用：在悬液状态下抑制细胞团块形成，在贴壁后促进细胞顶底极性的重建—— Na ⁺ /K ⁺ ATP 酶（ ATP1A1 ）和单羧酸转运蛋白 1 （ MCT1 ）重新定位于顶侧， BEST1 定位于底侧。

更精妙的是，研究团队发现 IL-13R α 2 是决定供体细胞命运的“分子开关”。 IL-13R α 2 在供体 RPE 早期阶段特异性表达， 可被两种配体竞争性结合： CHI3L1 驱动修复性轨迹，而 IL-13 则驱动纤维化轨迹。 EGFR 抑制将 IL-13R α 2 ⁺供体细胞从“ IL-13 驱动的纤维化命运”转向“ CHI3L1 驱动的修复命运”。

超越免疫抑制： EGFRi 的双重作用

传统观点认为移植物失败主要源于免疫排斥。但研究团队发现，即使在缺乏 T 、 B 、 NK 细胞的 NSG 免疫缺陷小鼠中，供体 RPE 仍然形成大团块，无法实现功能性整合。这提示——单纯抑制适应性免疫远远不够，供体细胞自身的上皮重 塑 才是整合的前提。

EGFR 抑制恰恰提供了这种“双重保障”：一方面通过 C HI3L1-IL13RA2 信号轴驱动供体细胞的上皮重建；另一方面，供体细胞分泌的 CHI3L1 还能重塑局部先天免疫微环境，诱导巨噬细胞向免疫抑制表型偏移，减少炎症性浸润。长期观察显示， EGFR 抑制组 的供体细胞至少维持整合状态达 4 周， RPE65 持续表达，感光细胞层更厚。

从“劣势”到“优势”：悬液移植的逆袭

传统观点认为， RPE 悬液移植的“不受控沉积”是其主要缺陷。但这项研究颠覆了这一认知—— 厄洛替尼 赋能后，悬液的流动性从限制转变为巨大优势。

在 RCS 大鼠进行性视网膜退行性模型中， 厄洛替尼不仅 促进了供体细胞整 合，而且在更晚期的退行性微环境中效果反而更为显著。这意味着， 厄洛替尼 辅助的 RPE 悬液移植可灵活适应不同形状和大小的萎缩病灶，避免了细胞片移植的尺寸不匹配和手术创伤问题。

空间 转录组 学进一步揭示， EGFR 抑制组中感光细胞与巨噬细胞的空间分离增强，退行性炎症相互作用减弱； TREM2 在供体 RPE 细胞中高表达，提示供体细胞可能获得了清除碎片的能力。

本研究 从临床痛点出发，通过单细胞水平的精细解析，揭示了 EGFR-CHI3L1-IL13RA2 信号轴在 RPE 移植整合中的核心调控作用，并提出了一种安全、经济、可立即转化 的优化策略。 厄洛替尼 辅助的 RPE 悬液移植策略有望将 RPE 移植的适用范围从终末期疾病扩展至 RPE 萎缩性疾病的各阶段。

南京医科大学第一附属医院 茅希颖博士 、 殷文婕博士 、 徐淼 为论文共同第一作者 。

原文链接：https://www.cell.com/cell-reports-medicine/fulltext/S2666-3791(26)00380-0

制版人：十一

学术合作组织

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