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maldi-tof测试流程
本期我们来讲讲maldi-tof具体的测试流程是怎么样的,有什么特殊的步骤,和一般的测试有哪些不一样。
01测前处理
在上机前,我们需要对样品进行前处理,一般包括以下步骤:
1)取样品与基质混合(10000:1)
2)将样品点在测试不锈钢点板上
3)将点板上的溶剂蒸发留下包含样品的基质固体
我们来详细说明一下为啥需要这几个步骤,而这几个步骤中需要注意的是有哪些?
1)首先我们添加的基质与样品的比例常规是要达到10000:1;也就是大部分都是基质,一是这样可以让大分子样品合理的分散成一个个分子,方便形成单独的准分子离子峰;二是确保接受激光能量的基本都是基质而不会影响到样品;
2)对于maldi-tof而言测试的样品量是很少很少的。如下图所示就是一般的进样板子,实际上在配置完之后我们只需要一滴足矣。
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maldi-tof样品量
3)是的没错,maldi-TOF测试的时候激光打击的是固体,我们所选的基质室温下一般也都是固体的,然后在测试的时候激光打上去,离子化的样品直接就能够从这个固体中被抛出来进入到飞行时间质谱分析器(所以才叫激光解吸)
02仪器测试
仪器测试部分其实就很简单了,将如上图的点板放入装置中,然后使用激光对样品进行短时间的脉冲打击一般这个激光打击的条件如下:
1)激光的波长一般选择337nm的紫外光,也是苯环结构的基质比较敏感的波段。
2)一般激光的照射时间是在ns级别,但是激光的能量会很高,简单的说就是在极短的时间内用极高的能量让样品来不及分解在基质的辅助下直接离子化;
就如下图所示:
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激光照射样品
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