胡检？乱检？误检？为何东风螺，成为检测乱象的重灾区？

最近，小编在检测过程当中发现，市面上东风螺的PCR试剂是很少的，因此，一些检测点却用虾的试剂，或者是鱼的试剂来检查东风螺，这一点让小编也感到很无语。这不仅让养殖户花了冤枉钱，还让一些潜在的病害滋生，给养殖带来风险。

今天小编用一些案例，告诉大家一些案例，供大家参考。文末还提供小编整理的东风螺检测建议（包括：如何通过检测，判断东风螺的优劣的技巧，供大家参考。）

一、跨物种混用检测试剂：

1、用虾类EHP试剂盒检测东风螺孢子虫：EHP只感染对虾，无法检出东风螺致病单孢子虫，出现假阴性；

大家可以通过上图可以看出，养殖户送东风螺过来检测虾肝肠孢虫（EHP）？这没有啥意义的，因为虾肝肠孢虫（EHP）是对虾专属微孢子虫，自然易感宿主只有南美白对虾、斑节对虾、罗氏沼虾等虾类，仅寄生虾肝胰腺上皮细胞 。因此，如果想检测东风螺，那么可以选择高发的孢子虫（单孢子虫），它和EHP基因序列完全不同。

2、VNNV试剂盒判定东风螺病害：NNV不侵染螺体，阳性仅代表水体污染，不能诊断螺发病，因此，养殖户想检测东风螺，需要选择东风螺专用试剂盒。

上图，就是有检测点，采用RS来检测东风螺。其实，一点意义都没有。RS全称是RSIV（Red Sea Bream Iridovirus）真鲷虹彩病毒的行业简写，配套荧光PCR试剂盒仅针对海水鱼类专用。他们易感宿主：石斑、金鲳、真鲷、鲈鱼、红鲷等30余种海水硬骨鱼类；特别是引物探针只靶向鱼类RSIV保守基因，仅识别鱼类体内增殖的病毒，所以，拿来筛查东风螺的病害，真的是太不专业了。

3、虾白斑WSSV、EMS、虾虹彩DIV1试剂盒拿去测鱼/东风螺，完全无诊断价值；

4、AbHV病毒试剂盒用来检测鱼虾：仅贝类、东风螺易感，鱼类、对虾不会感染该病毒，结果无意义。所以，该病毒PCR试剂可以用于来排查东风螺的病害。

5、鱼虾螺混养塘检出交叉病原，误判定当前养殖品种患病。比如东风螺检出VNNV核酸，只是滤食富集水体病毒，螺本身不会发病，养殖户盲目消杀造成应激。

二、核酸类型选错（DNA/RNA不分，直接检测失效）

1、DNA病毒用RNA试剂盒，RNA病毒用普通DNA试剂盒

RNA病原：VNNV神经坏死病毒、RV弹状病毒、CMNV偷死病毒，需要反转录RT-PCR试剂盒；普通DNA PCR无法扩增，一律假阴性；

DNA病原：弧菌、WSSV白斑、AbHV疱疹病毒、EHP、虹彩病毒，普通荧光PCR即可，无需反转录；

2.、混用体系：一套试剂同时检测DNA、RNA病原，扩增条件不匹配，Ct值失真、漏检潜伏病原，那么最后，检测就没有意义。

三、病害场景与试剂盒类型选错

1、只买普通定性试剂盒，忽略定量需求：

日常塘口预警、判断感染轻重需要荧光定量qPCR，只能定性的普通终点PCR，只能看有无病原，无法区分高载量爆发风险、低载量潜伏感染。

2、现场流动检测选液体试剂，实验室批量检测用冻干试剂盒：

很多检测点无冷藏条件，却用液体试剂：试剂降解，检测结果失真，有些检测点为了降低成本使用液体试剂，但是保存不当，试剂也非常容易失真；

3、混淆单重、多重试剂盒：

为了节省成本，很多检测点选用多种病原联检直接用多重试剂盒，样本载量过低时发生引物竞争，出现漏检；发病溯源优先单重特异性试剂盒，精准度更高。

四、养殖品种检测优先级错误

1、主次病原颠倒，只查次要条件菌，漏检核心致死病原

东风螺只测柱状黄杆菌、丝囊霉，不测哈维氏弧菌、AbHV；

对虾频繁检测链球菌、气单胞菌，忽视WSSV、EHP、EMS、副溶高致病弧菌；

2、人畜共患病原遗漏：成品不检测霍乱弧菌、创伤弧菌，存在商检扣押风险。

五、剂型、性能忽视带来的检测误差

1、贪图低价选用无特异性引物试剂盒，出现交叉假阳性：

近缘菌种区分不开：比如无法区分副溶弧菌与普通溶藻弧菌，健康塘口误判强致病弧菌超标，盲目用药。

2、忽视试剂盒灵敏度，潜伏期漏检：

普通试剂盒灵敏度低，仅能检出发病中后期高载量病原；苗期预检、潜伏筛查必须选用高灵敏度探针法试剂盒。

3、忽视保存条件差异

冻干型试剂盒误以为可以长期常温存放，但是长期高温存放酶活性衰减；液体探针试剂随意常温运输，核酸扩增失效。

六、配套搭配与实操认知错误

1、只用水体样本检测，不用检测东风螺组织内脏样本：

水体只能反映环境，病原潜伏在肝胰腺、鳃、内脏内，水体阴性不代表养殖生物不带菌，造成漏判；

2、检测时机错误，用药、消毒后采样送检：

有些养殖户在送检的时候，使用消毒剂、抗生素压制病原载量，试剂盒检出假阴性，无法反映塘口真实感染情况；

3、一套试剂盒覆盖全品类养殖，不分鱼虾螺单独配套检测组合，数据参考价值极低。

PS：大家若是想要小编最新整理的东风螺检测建议（内容包括：如何正确检测，如何通过检测来选好东风螺苗），加下方微信，小编可以发给您。