中国医科大学研究人员利用RFect siRNA转染试剂,成功实现了对小鼠血管内皮细胞(C166)的siRNA转染!
小鼠血管内皮细胞 C166 是血管生成与血管损伤研究中经典的内皮细胞模型之一。但这类细胞体外培养耐受性差、细胞状态易波动,对转染试剂毒性高度敏感,轻微刺激便会造成细胞皱缩、大面积脱落;再加上细胞膜屏障较强、胞吞摄取外源核酸效率偏低,常规脂质体转染阳性率低下,一直被公认为转染难度较高的细胞类型。
为克服这一转染难题,中国医科大学研究者在进行多番尝试后,最终使用RFect siRNA转染试剂成功将si-MCT2转染进小鼠血管内皮细胞(C166)的中!后续研究发现,敲低内皮细胞的MCT2同时给予高剪切力刺激,与对照组相比,细胞外上清液的乳酸含量明显降低,这证明内皮细胞乳酸分泌与MCT2相关。另外,将敲低MCT2的内皮细胞与巨噬细胞在高剪切力的条件下进行共培养,结果发现敲低MCT2会促使共培养组的巨噬细胞向M1型极化。
相关文献:低剪切力通过TGFβ R1/PI3K/AKT促进内皮细胞自噬下调MCT2增加巨噬细胞M1极化
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