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FITC-Lysozyme是异硫氰酸荧光素（FITC）与溶菌酶（Lysozyme）通过共价键结合形成的荧光标记物，兼具溶菌酶的抗菌活性与 FITC 的荧光示踪能力，在生物医学研究和细胞成像领域具有广泛应用。
一、基本信息
- 名称：FITC-Lysozyme（异硫氰酸荧光素标记溶菌酶）
- 纯度：95%
- 性状：淡黄色至绿色冻干粉末或溶液
- 溶解性：易溶于水和缓冲液（如 PBS，pH 7.4）
- 保存条件：需避光、低温保存，通常在 -20°C 下保存，以防荧光衰减
- 规格：常见规格有 1mg、5mg、10mg、50mg 等
结构式：
二、成分特性
FITC（异硫氰酸荧光素）
- 荧光特性：FITC 是一种绿色荧光染料，激发波长约为 495nm，发射波长约为 520nm，呈明亮绿色荧光，具有高量子产率和良好的光稳定性。
- 反应活性：FITC 的异硫氰酸酯基团能够与蛋白质中的胺基（如赖氨酸残基上的胺基）反应，形成稳定的共价键，从而将荧光素标记到蛋白质上。
溶菌酶（Lysozyme）
- 抗菌活性：溶菌酶是一种天然抗菌酶，能够水解细菌细胞壁中的肽聚糖，破坏细菌的结构，起到抗菌作用。
- 生物相容性：溶菌酶具有良好的生物相容性和安全性，在食品工业、医药领域均有应用。
FITC-Lysozyme
- 荧光与酶活性：FITC-Lysozyme 结合了 FITC 的荧光特性和溶菌酶的抗菌活性，既保留了溶菌酶的酶学活性，又赋予了其荧光示踪能力。
- 标记比例：标记比例和反应条件可控制荧光强度与酶活性平衡，通常每个溶菌酶分子标记 1-3 个 FITC 分子，以确保酶活性保留率≥80%。
三、制备方法
FITC-Lysozyme 的制备通常采用蛋白质的氨基特异性标记方法，核心在于控制反应条件以保留溶菌酶的生物活性。具体步骤如下：
- 将溶菌酶溶于 PBS 缓冲液（pH 9.0，浓度 0.1mol/L）中，配制成质量浓度 10mg/mL 的溶液，置于冰浴中预冷 30 分钟。
- 将 FITC 溶于无水 DMSO 中，配制成浓度 1mg/mL 的储备液，在搅拌条件下缓慢滴加到溶菌酶溶液中，控制 FITC 与溶菌酶的摩尔比为 5:1-10:1。滴加过程中保持冰浴，滴加完毕后移至 4℃冰箱，避光搅拌反应 8-12 小时。
- 反应结束后，采用透析法去除未反应的 FITC：将反应液装入截留分子量 10000Da 的透析袋，用 PBS 缓冲液（pH 7.4）在 4℃下透析 48 小时，期间更换透析液 4-5 次，直到透析外液在荧光灯下无明显荧光。
- 为进一步纯化，可采用凝胶过滤层析（Sephadex G-25 柱），以 PBS 缓冲液（pH 7.4）为洗脱液，收集第一洗脱峰（溶菌酶分子量大，洗脱速度快）。
- 最后，将收集到的溶液冷冻干燥，得到黄绿色粉末状纯品。
温馨提示：供应产品仅用于科研，不能用于人体！
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