物理诱变(射线、离子束等)和化学诱变(EMS、ENU等)是作物改良的经典手段。然而,曾经的诱变育种受限于基因组及功能基因信息的匮乏,主要依赖田间表型“盲筛”碰运气,效率低,大部分变异性状未发现等不确定性。
随着功能基因组学与高通量测序技术的成熟,诱变育种已完成范式转变:从基于表型的随机筛选,转变为基于基因型与序列信息的定向工程流程。
功能基因组学背景下的“定向诱变”
“定向”并非指基因编辑技术中的碱基定点修饰,而是指在明确的基因或代谢通路范围内,利用诱变技术创制等位变异,并通过高通量靶向测序或特异性分子标记检测高效筛选目标基因型。
举个例子A > 株高定向改良
某小麦品种综合性状优异,但株高偏高,易倒伏。利用诱变技术对该品种进行大规模诱变(如1万粒种子)后,依托M1-TDS(M1代靶向深度测序)技术定向分析
Rht基因序列,在M1代即可精准筛选携带目标突变的单株。然后利用分子标记辅助选择(MAS)进行少量的回交以净化背景,最快2年内即可获得遗传稳定、株高降低的改良新品系。
举个例子B > 生育期定向改良
某大豆品种产量高、品质好,但生育期过长,不适合轮作。利用电子束射线诱变获得2万份突变体群体后,利用M1-TDS技术在M1代直接针对生育期关键基因(如
E1系列)进行测序筛选,提前锁定突变单株;或在M2代进行大规模表型初筛(只保留生育期短的材料)。然后通过少量回交背景纯化,即可快速固定短生育期性状。
诱变育种的优势,技术难度低(大部分作物都可应用),成本可控,操作周期短,相对于转基因/基因编辑,无需复杂的生物安全评价流程。还有机会发现更多意想不到的表型材料。
反向遗传学(序列→功能)
基于TILLING(定向诱导基因组局部突变技术)及其衍生技术,通过外显子捕获测序或全基因组重测序,建立突变体群体的基因变异数据库,实现种质资源的数字化。基于此,研究者不再被动等待表型,而是直接在数据库中检索候选基因的错义、无义或剪接位点突变,快速构建等位基因系列,进行功能验证。
正向遗传学(表型→位点)
针对目标表型群体,利用MutMap或QTL-seq等基于极端混池测序(BSA)的方法,可快速定位主效QTL/基因。在后续改良过程中,利用高密度分子标记或育种芯片,可高效监控回交过程中的背景回复率。这有助于通过MAS快速剔除目标位点附近的连锁背景突变,加速遗传背景的净化与优良性状的固定。
超大规模突变体库的统计学优势与应用
诱变育种的本质是模拟自然变异,加速点突变(SNP)、插入缺失(InDel)、结构变异(SV)及重组的发生频率。当群体规模从几千、上万扩展到十万甚至更高数量级时,将产生显著的群体效应:
1.捕获稀有变异: 大规模群体显著提高发现极低频但高价值等位变异(如特定位点单碱基突变)的概率。
2.增强统计功效: 在混池测序分析中,大样本量能显著提高等位基因频率差异的信噪比,从而提高关联分析的准确性。
在实践中,EMS化学诱变会产生高密度的点突变,适用于构建等位基因系列及性状微调;而离子束或快中子诱变则倾向于产生大片段的结构变异,适用于染色体工程或打破紧密连锁。
然而,构建并维护如此高密度、大容量的突变体库,面临着巨大的时间成本与数据管理挑战。这使得将突变体材料转化为可复用的公共基础设施成为行业发展的必然趋势。
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平台内置基因ID转换、基因注释、Blast、序列获取、引物设计、基因组浏览器六大核心生信工具,无需切换平台即可在线完成序列提取、同源比对及批量引物设计。
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关于天成未来
天成未来是国内最早将靶向捕获测序技术应用于农业科学研究的企业之一,拥有超大规模的动植物基因组大数据库。公司以数据与计算为基础,提供分子育种检测、种质资源鉴定、突变体库数字化、功能基因组及生信分析服务,并自主开发了系列育种芯片与数据云平台。
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