Biotin WGA，生物素标记的小麦胚芽凝集素主要应用方向

一、试剂基本信息
英文名称：Biotin WGA，Biotin Wheat Germ Agglutinin
中文名称：小麦胚芽凝集素-生物素，生物素标记WGA，生物素标记的小麦胚芽凝集素
试剂规格：5mg，10mg，25mg
纯度等级：≥95%
货号：Y-R-4450
存储条件：建议存放于-20℃以下环境，保持冰冻、干燥，并避光保存。
溶解性能：本产品溶于部分有机溶剂。
二、使用注意事项
1.请注意避免频繁解冻，建议现配现用，确保产品性能稳定。
2.使用过程中务必保持产品干燥，避免阳光直射。
三、分子结构与作用基础
WGA是一种分子量约为36 kDa的蛋白质，其特异性识别并结合的靶标是N-乙酰氨基葡萄糖（GlcNAc）以及末端唾液酸（N-乙酰神经氨酸）。这两种糖基残基常见于真核细胞表面糖蛋白与糖脂的寡糖链末端或分支中。生物素是一种小分子维生素，对链霉亲和素（Streptavidin）或亲和素（Avidin）具有极高的亲和力。将生物素共价标记到WGA上，使得与特定糖基结合的WGA能够被链霉亲和素体系所检测或捕获。
四、 WGA的糖结合特性
选择性：WGA对含GlcNAcβ1-4GlcNAc序列的几丁质寡糖具有高结合力，同时对含有GlcNAc或唾液酸末端的复杂聚糖也表现出可测的结合活性。这种结合具有可饱和性与竞争抑制性。
功能影响：WGA与细胞表面糖复合物的结合，在实验条件下可能影响细胞间的相互作用或信号传导，这一特性常被用于功能干扰研究。
非免疫源性：作为植物来源的蛋白，WGA在哺乳动物细胞研究中通常不被视为抗体，但其结合可能引发某些细胞的非特异性响应，需在实验设计中予以控制。

五、生物素-链霉亲和素系统的优势
将WGA与生物素偶联，主要利用了生物素-链霉亲和素系统的高效性与灵活性：
信号放大：一个生物素化的WGA分子可结合多个标记有酶、荧光基团或胶体金的链霉亲和素分子，从而增强检测信号。
通用性：链霉亲和素可与多种报告分子（如荧光染料、酶、磁性微珠）稳定结合。这意味着同一批Biotin WGA标记的样本，可根据后续实验目的，灵活选择不同的检测或分离模块。
结合稳定性：生物素与链霉亲和素之间的亲和力极高，解离常数在10^-15 M级别，形成的复合物在多种洗脱条件下保持稳定。
六、主要应用方向
细胞膜糖复合物标记与成像：用于荧光或显微技术中，特异性标记细胞表面或细胞内特定细胞器（如高尔基体）上含有GlcNAc或唾液酸的糖结构，进行定位与分布研究。
糖蛋白的分离与富集：将Biotin WGA与链霉亲和素包被的固相支持物（如磁珠、琼脂糖珠）联用，可从复杂生物样品（如细胞裂解液、血清）中分离、纯化含有相应糖基的糖蛋白，用于后续的蛋白组学分析。
细胞分离与计数：基于特定细胞群体表面糖基化特征的差异，可利用Biotin WGA结合链霉亲和素标记系统，进行特定细胞亚群的分选或流式细胞术分析。
凝集素芯片技术：作为凝集素芯片上的固定探针之一，用于分析溶液中糖蛋白或细胞裂解液的糖基化谱模式。
七、使用注意事项
结合特异性验证：建议通过竞争性抑制实验（例如，使用游离的GlcNAc或唾液酸）确认结合的特异性。
浓度优化：过高浓度的WGA可能导致非特异性凝集或细胞毒性，需通过预实验确定合适的工作浓度。
内源性干扰：某些细胞或组织可能含有内源性生物素，在采用基于链霉亲和素的检测系统时需设置严格的阴性对照，必要时进行封闭处理。
储存与稳定性：本品应按照建议条件储存，避免反复冻融以维持活性。
八、相关试剂推荐
iFluor 680 酪胺（iFluor 680 Styramide） * Alexa Fluor 680酪胺的优异替代品*
Phalloidin-AMCA，Phalloidin-7-Amino-4-methylcoumarin acetate
Streptavidin, AF660 conjugate；AF660-链霉亲和素偶联物
iFluor 790 succinimidyl ester；iFluor 790 琥珀酰亚胺酯
Streptavidin, AF555 conjugate；AF555-链霉亲和素偶联物
Phalloidin-AMCA，Phalloidin-7-Amino-4-methylcoumarin acetate
1628064-03-8；UV-Tracer TCO Maleimide；紫外追踪-反式环辛烯-马来酰亚胺
APC Streptavidin(0.5 mg/mL)；Allophycocyanin-Streptavidin(0.5 mg/mL)
Phalloidin Amine，Phalloidin NH2
194041-66-2；Sulfo-NHS-LC-LC-Biotin；Biotin-XX-SSE
Phalloidin-AMCA，Phalloidin-7-Amino-4-methylcoumarin acetate
查看更多
Phalloidin Amine，Phalloidin NH2
以上由WWH编辑的试剂信息仅供科学研究或工业应用等非人体使用领域。