Qdot 655小麦胚凝集素，Qdot 655-WGA的偶联方法与工艺优化

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产品名称：Qdot 655小麦胚凝集素，Qdot 655-WGA的偶联方法与工艺优化
1. 结构与功能基础
Qdot 655量子点：发射波长约655nm，具有宽激发光谱、窄发射峰、高光稳定性及低光漂白特性，适合长时间成像。表面常修饰羧基/氨基，便于共价偶联。
小麦胚凝集素（WGA）：分子量约36-43kDa，特异性结合N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和唾液酸残基，广泛用于细胞膜糖蛋白标记、神经示踪及病原体检测。
复合结构：通过共价键（如酰胺键、硫醚键）或生物素-链霉亲和素系统偶联，形成兼具荧光成像与靶向功能的复合物。
2. 偶联方法与工艺优化
共价偶联：
EDC/NHS法：Qdot表面的羧基与WGA的氨基在EDC/NHS催化下形成酰胺键，需控制pH（8.0-8.5）、温度（25-37℃）及反应时间（2-4小时），避免副反应。
马来酰亚胺法：若WGA含半胱氨酸，可通过巯基与马来酰亚胺基团反应形成硫醚键，需在pH 6.5-7.5下进行以防止氧化。
生物素-链霉亲和素系统：生物素标记WGA后，与链霉亲和素偶联的Qdot结合，提高偶联效率与特异性。
点击化学：如CuAAC/SPAAC，通过炔基与叠氮基反应实现高效偶联，减少非特异性结合。
纯化与表征：透析/超滤去除小分子杂质，HPLC纯化确保纯度≥95%；质谱验证分子量，荧光光谱确认Qdot 655信号，流式细胞术验证WGA活性。
3. 应用场景与优势
细胞标记与成像：特异性标记细胞膜糖蛋白（如神经元、肿瘤细胞），用于细胞形态/功能研究、神经通路追踪及肿瘤边界识别。
多色荧光检测：Qdot 655的窄发射光谱支持多色成像，与Alexa Fluor、Cy系列染料兼容，实现高分辨率多目标标记。
免疫荧光与流式细胞术：检测组织/细胞表面糖蛋白表达，如免疫组化、流式细胞术分析。
微生物学研究：标记酵母芽痕、革兰氏阳性菌细胞膜及真菌几丁质，用于病原体检测。
优势：高光稳定性（减少光漂白）、低背景信号（高信噪比）、靶向特异性（WGA的糖结合能力）及多模态兼容性（适合多种成像技术）。

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