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产品名称:UV-Tracer-生物素-马来酰亚胺,UV-Tracer Biotin-CONH-Mal的合成与反应条件
1. 核心结构与功能特性
分子架构:由三部分组成——生物素(Biotin)提供高亲和力靶向能力(与链霉亲和素/抗生物素蛋白结合,亲和力常数Ka≈10¹⁵ M⁻¹);马来酰亚胺(Maleimide)在pH 6.5-7.5条件下与生物分子(如蛋白质、多肽)的巯基(-SH)发生共价反应,形成稳定硫醚键;UV-Tracer基团(如二苯甲酮片段)在365nm紫外光激发下发出蓝色荧光,实现实时标记效率监测。
连接方式:通过酰胺键(-CONH-)连接生物素与马来酰亚胺,形成“生物素-CONH-Mal”结构,整体分子式为C₅₄H₇₉N₇O₁₆S,分子量约1114.32,外观为黄色固体,纯度≥95%。
光学特性:紫外吸收峰位于320-350nm,荧光发射波长约450nm(蓝色),无需额外染料即可通过紫外光或荧光显微镜直接观测。
2. 合成与反应条件
合成路径:采用化学偶联法,生物素与马来酰亚胺通过酰胺键连接,UV-Tracer基团通过化学修饰或点击化学引入。反应需在无胺缓冲液(如PBS,pH 6.8-7.2)中进行,避免Tris或胺基竞争。
反应条件:室温(25℃)反应30-60分钟,需严格调控pH(6.5-7.5)以防止马来酰亚胺水解或副反应。反应后通过透析、凝胶过滤或HPLC纯化,去除未反应试剂。
储存与稳定性:-20℃避光干燥保存,避免反复冻融;溶解于DMSO或DMF后需分装冷冻,现配现用,防止氧化降解。
3. 核心优势与挑战
优势:
高特异性:生物素-亲和素系统提供纳米级亲和力,结合巯基反应实现精准标记。
实时监测:UV-Tracer基团支持无染料荧光追踪,简化实验流程并提升定量准确性。
生物相容性:马来酰亚胺反应条件温和,对生物分子活性影响小,适用于活体或细胞实验。
多功能集成:可与点击化学、生物正交反应结合,拓展功能化应用(如成像-治疗一体化)。
挑战:
合成复杂性:多步反应需精确控制条件,避免副产物生成;规模化生产需优化成本与批次一致性。
稳定性限制:马来酰亚胺易水解,需严格储存条件;UV-Tracer荧光可能受环境干扰。
临床转化障碍:目前主要用于科研,临床应用需验证长期安全性、代谢特性及免疫原性。
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